糖酵解的調節反應，醫學教育網整理如下：
糖酵解途徑中有3個不可逆反應：分別由己糖激酶（葡萄糖激酶）、6-磷酸果糖激酶1和丙酮酸激酶催化的反應。它們是糖無氧酵解途徑的三個調節點，其中以6-磷酸果糖激酶1的活性是該途徑中的主要調節點。
（一）己糖激酶活性的別構調節
骨骼肌中的己糖激酶的Km相對較小，在血糖達到一定濃度后，活性就能達到最高，它是一種別構酶，其活性受到自身反應產物6-磷酸葡萄糖的抑制。肝內的葡萄糖激酶的直接調節因素是血糖濃度，由于葡萄糖激酶Km相對較大，在餐后、血糖濃度很高時，過量的葡萄糖運輸到肝內，肝內的葡萄糖激酶激活；葡萄糖激酶也是別構酶，活性受到6-磷酸果糖的抑制，而不受6-磷酸葡萄糖的抑制，這樣可保證肝糖原順利合成。
（二）6-磷酸果糖激酶1的別構調節
6-磷酸果糖激酶1是糖酵解途徑中最重要的一個調節點，它是別構酶，由4個亞基組成，有很多激活劑和抑制劑。高濃度ATP、檸檬酸是此酶的變構抑制劑。ADP、AMP、2，6-二磷酸果糖（Fructose2，6bisphosphate，F-2，6-BP）是此酶的變構激活劑。2，6-二磷酸果糖盡管和1，6二磷酸果糖結構相似，但F-2，6-BP不是6-磷酸果糖激酶1的產物，而是6-磷酸果糖激酶1最強烈的激活劑、最重要的調節因素。
F-2，6-BP的生成是以6-磷酸果糖為底物在6-磷酸果糖激酶2（6-phosphofructokinase2，PFK2）催化下產生。醫學|教育|網搜集整理6-磷酸果糖激酶2是雙功能酶，包括6-磷酸果糖激酶2與2，6-二磷酸果糖酶2活性，它們同時存在于一條55x103（55kDa）的多肽鏈中。6-磷酸果糖激酶2的別構激活劑是底物F-6-P，在糖供應充分時，F-6-P激活雙功能酶中的6-磷酸果糖激酶2的活性、抑制2，6-二磷酸果糖酶2活性，產生大量F-2，6-BP.相反，在葡萄糖供應不足的情況下，胰高血糖素刺激產生cAMP，激活A激酶，使雙功能酶磷酸化后，雙功能酶中的6-磷酸果糖激酶2活性抑制而2，6-二磷酸果糖酶2活性激活，減少F-2，6-BP產生。由此可見，在高濃度葡萄糖的情況下，2，6-二磷酸果糖濃度提高，可激活6-磷酸果糖激酶1，促進糖酵解過程進行。F-2，6-BP在參與糖代謝調節中起著重要作用。
（三）丙酮酸激酶
丙酮酸激酶是糖酵解過程的第二個調節點，1，6-二磷酸果糖是此酶的別構激活劑，而ATP是該酶的別構抑制劑，ATP能降低該酶對底物磷酸烯醇式丙酮酸的親和力；乙酰輔酶A及游離長鏈脂肪酸也是該酶抑制劑，它們都是產生ATP的重要物質。