鑒別
取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含lmg的溶液,取0.05m置白色點滴板上,加N-乙酰-L-酪氨酸乙酯試液0.2ml,混勻后,顯紫紅色
制法要求
本品應從檢疫合格的牛或豬胰中提取,所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控制。
性狀
本品為白色或類白色結晶性粉末或無定型粉末。
檢查
酸度取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中含2mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為5.5~7.0。溶液的澄清度與顏色取本品,加水溶解并稀釋制成每lml中含2mg的溶液,依法檢查(通則0901第一法和通則0902第一法),溶液應澄清無色或幾乎無色胰蛋白酶取本品,加水溶解并稀釋制成每1m1中含16000單位的溶液,作為供試品溶液;取胰蛋白酶適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中含2500單位的溶液,作為對照溶液。取供試品溶液50l與對照溶液5μl,分別置白色點滴板上,各加對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液0.2ml,放置后,供試品溶液應不呈現紫紅色或呈色時間遲于胰蛋白酶對照溶液。干燥失重取本品約0.2g,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥4小時,減失重量不得過5.0%(通則0831)。熾灼殘渣不得過2.5%(通則0841)。
效價測定
照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。底物溶液冰凍保存,但不得反復凍融。取N-乙酰-L酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫鈉溶液61.1ml,混合,pH值為7.0)50ml,溫熱使溶解,冷卻后再稀釋至刻度,搖勻供試品溶液取本品適量,精密稱定,加0.0012mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含12~16糜蛋白酶單位的溶液。測定法取0.0012mol/L鹽酸溶液0.2ml與底物溶液3.0ml,在25℃±0.5℃,于237nm的波長處測定并調節吸光度為0.200。再精密量取供試品溶液0.2ml,加底物溶液3.0ml,立即計時并搖勻,每隔30秒讀取吸光度,共5分鐘(重復一次),吸光度的變化率應恒定,恒定時間不得少于3分鐘若變化率不能保持恒定,可用較低濃度另行測定。每30秒的吸光度變化率應控制在0.008~0.012,以吸光度為縱坐標,時間為橫坐標,作圖,取在3分鐘內成直線部分的吸光度,按下式計算。A-A0.0075TW 式中P為每1mg廉蛋白酶的效價,單位A2為直線上開始的吸光度;A1為直線上終止的吸光度; T為A2至A1讀數的時間,分鐘;W為測定液中含供試品的量,mg;0.0075為在上述條件下,吸光度每分鐘改變0.0075,即相當于1個糜蛋白酶單位
類別
蛋白分解酶
貯藏
遮光,密封,在陰涼處保存
制劑
注射用糜蛋白酶