索氏提取法注意事項

注意事項

脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中，測定脂肪的含量，可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法，其中索氏提取法（Soxhlet extractor method）是公認的經典方法，也是我國糧油分析首選的標準方法。索氏抽提法以索氏提取器為提取儀器，采用低沸點有機溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂肪物質，因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。

河南農業大學自2006 年開設農產品標準化與貿易專業以來，農產品中脂肪含量測定實驗一直是本專業的本科生主要實驗之一，結合近年來實驗教學中總結的一些體會，筆者就索氏提取法測定農產品中脂肪含量實驗中試劑選擇、樣品處理、提取等幾個注意事項進行探討。

抽提試劑的選擇

利用相似相溶規律，農產品中脂肪極性一般較小，可采用石油醚或乙醚作為抽提試劑。常見實驗室用石油醚有低沸程（30~60℃）和高低沸程（60~90℃）兩種，一般選用低沸程石油醚為抽提溶劑有利于縮短提取時間。若選擇乙醚為抽提試劑，則必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內應嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內良好通風，以防燃爆。乙醚中過氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現黃色則表明存在過氧化物，應進行處理后方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5 乙醚量的稀KOH 溶液洗滌2~3 次，以除去乙醇；然后用鹽酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過氧化物；最后用水洗至中性，用無水CaCl2 或無水Na2SO4 脫水，并進行重蒸餾。

樣品粉碎度

試樣粗細度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結果。

實驗中的干燥處理

測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。這是因為：（1）抽提體系中若有水，會使樣品的水溶性物質溶出，導致測定結果偏高；（2）抽提體系中若有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水）,從而影響抽提效率；(3)樣品中若有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內部，結果不易將脂肪抽提干凈。

抽提過程中注意事項

將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67 倍的石油醚，使樣品包完全浸沒在石油醚中。連接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒溫水浴中進行抽提，調節水溫在70~80℃之間，使冷凝下滴的乙醚成連珠狀（120~150 滴/min 或回流7 次/h 以上），抽提至抽取筒內的乙醚用濾紙點滴檢查無油跡為止（約需6~12h）。抽提完畢后，用長鑷子取出濾紙包，在通風處使乙醚揮發（抽提室溫以12~25℃為宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。

其他方面

（1）索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1~2 次，然后浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續抽提，則可明顯縮短抽提時間。

（2）若實驗中樣品較多的話，可采用容量更大的YG- Ⅱ型油分測定器來測定脂肪含量，溫度控制在70℃左右，8h 可提取完畢。