紫外分光光度法對阿司匹林的含量測定

紫外分光光度法對阿司匹林的含量測定

　　儀器類型有：單波長單光束直讀式分光光度計，單波長雙光束自動記錄式分光光度計和雙波長雙光束分光光度計。

　　應用范圍包括：①定量分析，廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機和有機物質的測定。②定性和結構分析，紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應、氫鍵的強度、互變異構、幾何異構現象等。③反應動力學研究，即研究反應物濃度隨時間而變化的函數關系，測定反應速度和反應級數，探討反應機理。④研究溶液平衡，如測定絡合物的組成，穩定常數、酸堿離解常數等。

對溶劑的要求：含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用范圍均不能小于截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm 。另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置25px石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸收度。溶劑和吸收池的吸光度，在220～240nm 范圍內不得超過0.40，在241～250nm范圍內不得超過0.20，在251～300nm范圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。

測定時，除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用25px的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，或由儀器在規定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內，并以吸光度最大的波長作為測定波長。（1）鑒別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。（2）含量測定①對照品比較法：按各品種項下的方法，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100％±10％，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后，按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶ C_X＝（A_X/A_R）C_R ，式中 C_X為供試品溶液的濃度； A_X為供試品溶液的吸收度； A_R為對照品溶液的濃度； C_R為對照品溶液的吸收度。②吸收系數法：按各品種項下的方法配制供試品溶液，在規定的波長處測定其吸光度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時，吸收系數通常應大于100，并注意儀器的校正和檢定。③比色法：供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。

本實驗樣品阿司匹林腸溶片屬片劑(腸溶)。本品屬于非甾體抗炎藥。可用于鎮痛解熱，抗炎，抗風濕，關節炎，抗血栓。阿司匹林為白色針狀或板狀結晶或粉末。熔點135℃。無氣味，微帶酸味。在干燥空氣中穩定，在潮濕空氣中緩緩水解成水楊酸和乙酸。能溶于乙醇，乙醚和氯仿，微溶于水，在氫氧化堿溶液或碳酸堿溶液中能溶解，但同時分解。是應用最早，最廣和最普通解熱鎮痛藥抗風濕藥。具有解熱、鎮痛、抗炎、抗風溫和抗血小板聚集等多方面的藥理作用，發揮藥效迅速，藥效肯定，超劑量易于診斷和處理，很少發生過敏反應。常用于感冒發熱,頭痛、神經痛關節痛、肌肉痛、風濕熱、急性內濕性關節炎、類風濕性關節炎及牙痛等。

1  實驗儀器與試劑

1.1 儀器

紫外分光光度計（Cintra404,GBC）、電子天平（AB135-S，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司METTLER TOLEDO）、微孔濾膜（尺寸25mm，孔徑0.8μ，上海半島實業有限公司凈入器材廠）

1.2 試劑

阿司匹林腸溶片（25mg/片，臨汾寶珠制藥有限公司，批號100301）：取20片稱重，并研磨成粉，備用，計算得藥粉的平均片重為73.93/mg。

阿司匹林貯備液溶液（1.5368mg/ml，實驗室提供）

無水乙醇（分析純，天津市富宇精細化工有限公司）

2  方法與結果

2.1 方法

2.1.1 確定檢測波長

先量取0.5ml的阿司匹林儲備液，用無水乙醇稀釋至25ml。用紫外分光光度計掃描阿司匹林的紫外圖譜，選取303nm處為紫外吸收檢測波長。

2.1.2 標準溶液制備

阿司匹林的濃度線性范圍為0.0124 mg/ml-0.0435 mg/ml，儲備液的濃度為1.5368 mg/ml。故分別移取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml儲備液。用無水乙醇稀釋至25ml即得。

2.1.3 樣品溶液制備

平行稱量樣品101.0mg、101.8mg、106.0mg，分別用無水乙醇溶解，定容至25ml容量瓶中即得。

2.1.4 測量

設定好參數后，轉換進入計算模式。先進行空白調零，分別對6個不同濃度的標準溶液進行3次平行檢測。再將樣品溶液過濾后進行紫外檢測，同樣平行測量3次。

2.2. 方法學研究

2.2.1標準曲線的建立

分別精密量取該阿司匹林儲備液（1.5368 mg/ml）0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml儲備液。用無水乙醇稀釋至25ml搖勻即得系列濃度的對照品溶液，用紫外分光光度法，在上述條件下測定紫外吸光度A，分別測3次，取平均值，以紫外吸光度（A）對濃度（C）回歸處理，得標準曲線和回歸方程。

表1 標準曲線實驗

圖2 阿司匹林的標準曲線

在0.0124 mg/ml-0.0435 mg/ml濃度范圍內，阿司匹林的濃度與吸光度成線性，標準曲線方程：A=16.095C+0.003，相關系數：r=0.9998。

2.2.2 精密度試驗

分別精密量取該阿司匹林儲備液（1.5368 mg/ml）0.35、0.50、0.65ml置25ml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻即得，照紫外分光光度法，在上述條件下測定吸光度A。平行操作3份。

表2 精密度實驗

2.2.3 回收率實驗

分別精密量取阿司匹林儲備液（1.5368 mg/ml）0.2、0.25、0.3ml置25ml容量瓶中，再分別加入1.0ml樣品溶液，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得高、中、低三種濃度溶液，濾過，棄去初濾液，用續濾液測定吸光度A，平行操作3份，計算回收率。

表3 回收率實驗

2.3. 樣品含量測定

根據樣品的標示量，取20片阿司匹林腸溶片置于研缽中研磨，求平均片重，平行稱量樣品101.0mg、101.8mg、106.0mg，分別用無水乙醇溶解，定容至25ml容量瓶中即得樣品溶液，用微孔濾膜過濾，取濾液進行測定。

表4 樣品測得熒光強度數據及處理