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  • 發布時間:2018-08-07 08:52 原文鏈接: 紫外分光光度法對黃芩總黃酮的提取工藝研究

    黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi為常用中藥之一,具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效。其主要有效成分為黃酮類化合物。現代藥理研究證明黃芩不僅具有明顯的抗菌消炎、抗過敏、抗氧化、抗癌和抗病毒等作用,而且對心血管疾病也具一定的作用。從黃芩中提取黃芩苷的工藝研究報道大多以水為溶劑進行煎煮提取,但此法黃芩苷的收率低,生產周期長。本研究采用正交實驗,總黃酮為指標,對各影響因素進行研究,得到較佳的提取工藝,較大地提高了收率。

     

    1材料與儀器

          1.1材料藥材:黃芩;試劑:黃芩苷標品;甲醇;甲醇;磷酸。

          1.2儀器:UV-1500PC紫外分光光度計(美析(中國)儀器有限公司)。

     

    2方法與結果

          2.1黃芩總黃酮標準曲線的制作精密稱定3mg的干燥至恒重的黃芩苷標品,用甲醇定容于100ml容量瓶中,搖勻,作為對照品溶液,備用。用對照品溶液以甲醇為空白對照,進行190~500nm的紫外掃描。掃描結果顯示在波長277.6nm處有最大吸收值,所以選擇277.6nm做為檢測波長。觀察對照品溶液于1h內的穩定性時,變化很小,因此采用不加顯色劑方法直接測定黃芩總黃酮。精密吸取對照品溶液0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml,分置10ml容量瓶中,用甲醇定容到刻度,搖勻,以0.00ml對照品溶液作空白,于277.6nm處測定吸光度(A)。以A對濃度(C)進行線性回歸,其方程為Y=66.878X-0.003(R2=0.9996,r=0.9998)。

     

          2.2正交設計優化黃芩中總黃酮的提取工藝用L9(34)正交表來選擇黃芩的最佳提取工藝。稱取藥材9份,每份50g。用30%乙醇提取,以總黃酮含量為指標,考察影響提取效果的3個因素:溶劑用量、最佳提取時間、提取次數。每份藥材提取后過濾,合并濾液,定容于277.6nm處測定吸光度(A),測定提取物中總黃酮的含量。

     

          3結果分析從正交分析結果及方差分析表來看,各因素對黃芩中總黃酮含量的影響程度為C>A>B,且C為極顯著性差異因素,A、B為顯著性差異因素,C3>C2>C1,A1>A2>A3,B3>B2>B1,最佳提取條件為A1B3C3,即溶劑用量(12,10,10),提取時間(2,1,1)h,提取3次為最佳提取工藝條件。

     

          4討論分光光度法測定黃酮含量的常用方法有直接測定法、Al(NO3)3法和AlCl3法,為了選擇合適的測定方法,我們用對照品溶液以甲醇為空白對照,進行190~500nm的紫外掃描。掃描結果顯示在波長277.6nm處有最大吸收值,峰形好,所以選擇277.6nm做為檢測波長。進一步觀察對照品溶液于1h內的穩定性時,變化很小,因此采用不加顯色劑方法直接測定黃芩總黃酮。

     

            根據實驗結果本實驗優選的最佳工藝為:提取溶劑為30%乙醇,提取3次,分別加12,10,10倍量溶劑,提取時間2,1,1h。為了驗證這一結果,取3份藥材,每份50g,按照所選的提取工藝:提取溶劑為30%乙醇,提取3次,分別加12,10,10倍量溶劑,提取時間2,1,1h。最后得到總黃酮含量分別為19.03%,18.65%,19.48%。通過驗證實驗,總黃酮的提取效率都得到了比較好的結果。說明所選的工藝是穩定而有效的,適合繼續放大生產。

     


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