纈草（ｖａｌｅｒｉａｎａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）為敗醬科纈草屬，多生于海拔８００～２ ５００ ｍ的山坡草地和林下，是一種多年生耐寒開花植物，分布于中國西南及東北地區，具有鎮靜催眠、神經保護、保護腎臟、調節循環系統、抗抑郁和抗腫瘤等藥理活性［１］。纈草素類成分（ｖａｌｅｐｏｔｒｉａｔｅｓ）是纈草的主要活性成分，具有鎮靜、催眠、抗焦慮、抗病毒、抗胃癌、解痙和舒張血管等藥理作用［２－７］。纈草化學成分復雜，不同來源纈草有效成分組成和含量均有差異，目前纈草中纈草素類成分含量的測定方法有ｈｐｌｃ法和電位滴定法［８，９］，這類方法通常操作復雜，分析成本高。本試驗采用紫外分光光度法測定纈草藥材中總纈草素含量，旨在為建立纈草素快速分析方法提供參考。
１ 材料與方法
１．１ 材料
纈草采自貴州某地，粉碎后過６０目篩，待用。
纈草素標準品（四川維克奇生物科技公司）；分析純甲醇和乙酸乙酯。
１．２ 儀器
ｔ６新世紀紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）、ｋｑ５２００超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。
１．３ 方法
１．３．１ 標準品制備 稱取適量纈草素，用甲醇配制成１００ μｇ／ｍｌ的標準貯備液，分別取不同體積（０．２５～１．２５ ｍｌ）的纈草素標準貯備液于５ ｍｌ比色管中，用甲醇定容至刻度，搖勻，配制成系列濃度的標準工作溶液。
１．３．２ 樣品制備 準確稱取纈草粉０．５ ｇ于具塞三角瓶中，加入乙酸乙酯５０ ｍｌ，浸泡２４ ｈ后，超聲提取４０ ｍｉｎ，過濾，用乙酸乙酯定容至５０ ｍｌ，取濾液０．２ ｍｌ揮干，用甲醇溶解后定容于５ ｍｌ比色管中。
１．３．３ 測定 以甲醇作空白試劑，在最大吸收波長處測定標準工作液的吸光度，繪制工作曲線，以相同條件測定樣品液吸光度，計算樣品中的含量。
２ 結果與分析
２．１ 測定波長的選擇
在２００～４００ ｎｍ范圍內分別掃描纈草素標準溶液及樣品溶液，由圖１可知纈草素標準溶液在２５６ ｎｍ處有最大吸收，故選擇測定波長為２５６ ｎｍ。
２．２ 工作曲線
按試驗方法繪制纈草素的工作曲線，結果表明吸光度ａ與纈草素濃度ｃ在５～２５ μｇ／ｍｌ范圍內具有良好的線性關系，其線性回歸方程為ａ＝０．０３８ ３ ｃ＋０．００４ ２，ｒ＝０．９９９ ８。
２．３ 精密度
取樣品溶液按試驗方法重復測定６次，結果吸光度的ｒｓｄ為０．０８％，表明儀器精密度良好。
２．４ 穩定性
取樣品溶液按試驗方法在５ ｈ內每隔１ ｈ測定１次，結果吸光度的ｒｓｄ為１．９３％，表明樣品溶液在５ ｈ內穩定性良好。
２．５ 重復性
取同一樣品溶液按試驗方法平行測定６次，結果其總纈草素含量的ｒｓｄ為１．９６％，表明方法重現性良好。
２．６ 回收率
為驗證試驗的準確性，在樣品溶液中加入纈草素標準溶液進行回收試驗并計算回收率，由表１可知加樣回收率為９８．９４％～１０１．０７％，試驗結果準確度高，符合分析要求。