紫外分光光度法測定食品中防腐劑

1)原理

樣品中的苯甲酸在酸性條件下可隨水蒸氣蒸出,與樣品中的非揮發性組分分開,然后用硫酸和重鉻酸鉀溶液處理,使苯甲酸以外的其他有機物氧化分解,將此氧化后的溶液再次蒸餾,用堿液吸收苯甲酸。純凈的苯甲酸鈉在225nm處有最大吸收,測定吸光度值并與標準品比較,即可計算出樣品中苯甲酸的含量。

2)操作方法

(1)樣品處理    稱取10.0g均勻的樣品,置于250mL蒸餾瓶中,加1mL磷酸、20g無水硫酸鈉、70mL水、數粒玻璃珠,進行蒸餾。用預先加有5mL0.1mol/ NaOH的50mL容量瓶接收餾出液,約收集到45mL時停止蒸餾,用少量水洗滌冷凝器,最后稀釋至刻度。吸取蒸餾液25mL置于另一250mL蒸餾瓶,加入33mmol/L重鉻酸鉀溶液25mL、2mol/L硫酸溶液6.5mL,加熱回流10min,冷卻,再加1mL磷酸、20g無水硫酸鈉、40mL水、數粒玻璃珠,按上述方法進行第二次蒸餾,收集餾出液并稀釋至刻度。

(2)測定    取第二次蒸餾液5～20mL,用0.01mol/L NaOH定容至一定體積,以0.01mol/L NaOH為對照液,于225nm處測定吸光度值。

用5mL 1mol/L氫氧化鈉代替1mL磷酸進行第一次蒸餾,按上述樣品處理方法做空白試驗,測定空白溶液的吸光度。

3)結果計算

式中    X——樣品中苯甲酸的含量,g/kg;

           m₁——測定用樣品溶液中苯甲酸的含量,mg;

           m₀——測定用空白溶液中苯甲酸的含量,mg;

           V——測定用第二次蒸餾液的體積,mL;

           m——樣品的質量。