紫外可見分光光度法檢測通過光催化降解的芳香標記物

用 Agilent Cary 60 紫外-可見分光光度法檢測通過光催化降解的芳香標記物

作者

Fyfe, DJ* 和 **Dong, XW

*Fyfe Science, West Lakes Shore, SA 5020, Australia

**School of Chemistry, University of Melbourne, Parkville Campus, VIC 3010, Australia

摘要

Agilent Cary 60 紫外-可見分光光度計是革命性 Cary 50 紫外-可見分光光度計的升級改良型。這個儀器平臺可以用來評估其潛在的消除不必要的光漂白色標記的能力，這個應用常用于普通的紫外-可見儀器。在這篇簡短的綜述中，我們展示了 Cary 60 獨特的ZL光學元件如何能夠測量多種應用中的芳香標記物的吸光度，同時確信在測量樣品吸光度時不會發生光漂白。

前言

在紫外-可見分光光度法的多種應用中，有許多光漂白標記物可供選擇，例如亞甲基藍，這是一種用作標記物的三環雜芳族化合物。亞甲基藍特別容易發生光漂白¹，在監測許多物質(例如 DNA)旋轉動力學的瞬時光致二向色性實驗中用作標準外在探針²。

在許多應用中不希望出現光漂白，因為需要保留所用探針(或比色劑)的分光光度完整性³。這對于其他本身會引起光漂白的紫外-可見光儀器可能相當困難。在本篇綜述中，我們將展示 Cary 60 紫外-可見分光光度計如何利用獨特的光學設計和脈沖氙燈技術使三環雜芳族化合物不發生光漂白。

儀器和材料

方法和結果

用 3 mL 純化水在一次性比色皿中通過 Cary WinUV 掃描應用程序得到一條基線(空白)。然后，記錄 10 次疊加掃描的數據，如圖 1 所示，其目的如下：1) 確定動力學研究的最大吸收波長;2) 檢查 Agilent Cary 60 紫外-可見分光光度計的重現性。

確定吸收峰值為 664 nm(圖 1)后，按照 Kok 等人1 的方法設置儀器重復獲取數據，不同之處在于在本例中，我們將暴露時間從 10 分鐘延長到 20 分鐘，以進一步評估 Agilent Cary 60 對亞甲基藍的任何光漂白作用。結果如圖 2 所示。

盡管連續照射了長達 20 分鐘，但圖 1 和圖 2 都表明沒有檢測到亞甲基藍的光降解。相比之下，在 Kok 等人1 的報導中可以發現，在測量亞甲基藍時隨著時間的推移出現了明顯的光漂白。結果表明，在研究將三環雜芳族化合物用作比色指示劑或存在光漂白問題的系統時，Cary 60 紫外-可見分光光度計是理想之選。

結論

以上數據表明，新的 Agilent Cary 60 紫外-可見分光光度計不會引發光敏樣品的光降解，通過其獨特的脈沖氙燈進行測量可確保結果始終可測、準確和重現。

1. Kok, C. et al 2005. Study of Photobleaching Mechanism in Methylene Blue Sensitized Gelatin Using a Single Beam UV-Vis Fiber Optics Spectrophotometer. Pertanika J. Sci. & Technol. 2005, 13(1), 23-30.

2. Fujimoto et al 1994. Fluorescence and Photobleaching Studies of Methylene Blue Binding to DNA. J. Phys. Chem. 1994, 98, 6633-6643.

3. Comerford, J. 1998. Investigations of Photochemical Reactions using UV/VIS Spectroscopy. Application UV-76, February 1998 (www.agilent.com).