紫外-可見分光光度法測定桂蒲腎清片中膽酸的含量
摘要：目的：建立桂蒲腎清片中膽酸的含量測定方法。方法：采用紫外分光光度法，以60%冰醋酸溶液為溶劑，對樣品的提取檢測波長為605nm。結果：桂蒲腎清片中膽酸的含量限度為不低于2.0mg/片，膽酸在6.93～41.60μg 范圍內線性關系良好，r=0.9996（n=6）；平均回收率99.78%（RSD=0.32%，n=9）。結論：該方法簡便、快速、穩定可靠，可作為桂蒲腎清片的含量測定方法。
關鍵詞：桂蒲腎清片膽酸紫外-可見分光光度法
1 儀器與試藥
賽默飛世爾（thermofisher ） 紫外分光光度計 GENESYS 10S；梅特勒電子
天平（精確至十萬分之一）；電子恒溫水浴鍋（上海金橋科技儀器廠）；膽酸對照品（購于中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號：100078-200414）、冰醋酸（分析純）、水為重蒸水、醋酸乙酯（分析純）、硫酸（分析純）、糠醛（重蒸至無色）、三氯甲烷（分析純）。
2 方法與結果
2.1 溶液的制備
2.1.1對照品溶液的制備：
精密稱取經105℃干燥4小時的膽酸對照品13.00mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含膽酸0.52mg）。
2.1.2 供試品溶液的制備：
取本品，研細，取1.5g，精密稱定，置100ml 量瓶中，精密加入乙酸乙酯50ml，稱定重量，超聲處理30 分鐘，放冷，用乙酸乙酯補足損失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密吸取續濾液各10ml 于蒸發皿中，在水浴上揮干，用60%的冰醋酸溶液溶解并定容至10ml，即得。
2.1.3 檢測波長的選擇：
取膽酸對照品溶液適量，加入60%冰醋酸溶液稀釋成1ml，再分別加新制的糠醛溶液（1→10）1.0ml，搖勻，在冰浴中放置5 分鐘，精密加入硫酸溶液（取硫酸溶液50ml 與水65ml 混合）13ml，混勻，在70℃水浴中加熱10 分鐘，迅速移至冰浴中，放置2 分鐘，以相應的試劑作為空白，照紫外-可見分光光度法，于500～700nm 波長范圍內掃描，膽酸對照品在（605±1）nm 處有最大吸收。
2.1.4 線性關系的考察：
分別精密吸取上述膽酸對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml 與1ml，分別置具塞試管中，各加入60%冰醋酸溶液稀釋成1.0ml，再分別加新制的糠醛溶液（1→10）1.0ml，搖勻，在冰浴中放置5 分鐘，精密加入硫酸溶液（取硫酸溶液50ml 與水65ml 混合）13ml，混勻，在70℃水浴中加熱10 分鐘，迅速移至冰浴中，放置2 分鐘，以相應的試劑作為空白，照紫外-可見分光光度法（《中國藥典》2005 版一部附錄VA），在605nm 波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，記錄色譜圖，