紫外-可見分光光度法的使用方法
（1） 波長 由于環境因素對機械部分的影響，儀器的波長經常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm與576.96nm，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正，鈥玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm與637.5nm波長處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因來源不同或隨著時間的推移會有微小的差別，使用時應注意。 （2）吸光度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定 ，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，在規定的波長處測定并計算其吸收系數，并與規定的吸收系數比較，應符合表中的規定。 波長/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收系數 的規定值
124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系數 的許可范圍
123.0～126.0
142.8～146.2
47.0～50.3
105.5～108.5
（3） 雜散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率，應符合表中的規定。 試劑濃度%（g/ml）測定用波長（nm）透光率 %碘化鈉
1.00 220 <0.8 亞硝酸鈉5.00340<0.8
測定時，除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，或由儀器在規定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內，并以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增大為準，由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度后應減去空白讀數，或由儀器自動扣除空白讀數后再計算含量。當溶液的pH值對測定結果有影響時，應將供試品溶液和對照品溶液的pH值調成一致。 （1） 鑒別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。 （2） 含量測定 一般有以下幾種。 按各品種項下的方法，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100%±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后，按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶ CX=（AX/AR）CR 式中
CX為供試品溶液的濃度； AX為供試品溶液的吸光度； CR為對照品溶液的濃度； AR為對照品溶液的吸光度。 供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。 用比色法測定時，應取數份梯度量的對照品溶液，用溶劑補充至同一體積，顯色后，以相應試劑為空白，在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度，并求出其含量。 也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作，顯色后，以相應的試劑為空白，在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度，按上述（1）法計算供試品溶液的濃度。 除另有規定外，比色法所用空白系指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應試劑，并用同樣方法處理制得。