2016年12月 美國醫學雜志（JAMA，影響因子37.684）發表了一篇“混合糾正試驗：用于評估異常的凝血檢驗結果”[1]。這個古老的檢測項目再次深入了全球臨床醫生的視野。當前，仍有很多醫院檢驗科并未開展此項、臨床醫生對結果判斷存在困惑。本文就開展APTT糾正試驗常面對的問題簡單介紹：
什么是糾正試驗？
糾正試驗（也稱混合試驗或mixing study）是通過將患者的血漿與正常人的混合血漿按照比例混合后，重新檢測相關檢測項目。這個檢測項目主要是針對于常規凝血檢測項目（如APTT，也可應用于PT、TT）的檢測特點而設定的，常規的APTT檢測結果只反應了體內50%的內源性凝血因子的活性，也就是說只有體內凝血因子降低>50%（不同試劑檢測差異較大，部分試劑可檢測出低于正常水平15%~30%血漿凝血因子異常）時，其檢測時間才延長（此時臨床上出血風險增高）。患者血漿在加入混合正常人血漿100%的凝血因子，使混合后血漿中含有>50%的凝血因子，可使檢測結果糾正至正常或明顯短縮。
什么時候需要啟動糾正試驗？
目前沒有統一的共識。這也是臨床醫生不做APTT糾正試驗的原因之一。建議APTT結果延長，且無明確影響結果延長的因素時，應啟動糾正試驗。當前的教材[2]將APTT時間超過正常對照10秒、PT、TT超過3秒定義為延長。
需要排除的常見原因：使用肝素制劑、血友病史、VWD病史。
怎么做糾正試驗？
國內《全國臨床檢驗操作規程（第二版、第三版、第四版）》和檢驗教材只談了結果意義確未描述具體操作方法，出現了臨床醫生想檢測糾正試驗但檢驗科不會做的尷尬局面。
具體操作方法如下：
1、制備正常混合血漿 國外[3]建議至少20人份正常人制備正常混合血漿。
2、將患者血漿與正常混合血漿量按1:1混合，即刻和37度水浴2h后分別檢測APTT，同步用正常混合血漿做對照（非常重要）。
3、結果判斷推薦使用Rosner指數，判斷閾值為11。即：<11為糾正，>11為未糾正。Rosner指數=（1:1混合血漿秒數-正常混合血漿對照秒數）*100/患者血漿秒數。
然而，在很多基層醫院可能在4h內很難集齊20人份正常標本，而放棄檢測。使用多份正常人血漿混合的目的是盡可能避免一些看似“正常（輕度凝血因子缺乏）”的血漿被誤用而造成結果的誤判。因此，個人建議實驗室可根據自身條件盡可能選擇多份（≥5份）正常人血漿制備混合血漿，20份僅為推薦建議。37度水浴，主要考慮因子抑制物存在時間和溫度依賴性[4]。具體水浴時間1小時還是2小時，也并未統一。國內全國臨床檢驗操作規程和血友病診斷和治療中國專家共識[5]均推薦2h。
如何解讀糾正試驗的結果？
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序號 |
即刻 |
37度水浴2h |
判斷 |
可能原因 |
進一步檢測 |
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1 |
糾正 |
糾正 |
糾正 |
因子缺乏，VWD, |
FVIII、FIX、FXI、FXII、VWFAg檢測 進一步使用正常血清進行糾正試驗，如未糾正缺FVIII， |
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2 |
糾正 |
不糾正 |
不糾正 |
因子抑制物 |
血漿凝血因子抑制物檢測 |
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3 |
不糾正 |
不糾正 |
不糾正 |
狼瘡抗凝物 |
血漿狼瘡抗凝物檢測 |
改至：全國臨床檢驗操作規程(第4版)2015.3 第四章血栓與止血 P97 圖1-4-1
為什么APTT延長時，不直接做凝血因子測定呢？
一方面，APTT糾正試驗即簡單又具有可操作性。實驗室常開展了APTT檢測，但可直接檢測因子的實驗室較少[6]。需要時，再進一步檢測確認。另一方面，凝血因子僅是APTT延長的原因之一，更常見是非凝血因子缺陷所致的，例如狼瘡抗凝物、因子抑制物、vWF等。APTT糾正試驗也可以作為血友病患者療效不佳（產生因子抑制物）判斷手段之一。因此，凝血因子檢測并不能代替APTT糾正試驗。
綜上所述，APTT糾正試驗是指明APTT延長原因簡單而實用工具。