紅細胞脆性的測定

發布時間：2019-04-23 07:29 原文鏈接：紅細胞脆性的測定

實驗概要

學習測定紅細胞滲透脆性的方法，理解細胞外液滲透張力對維持細胞正常形態與功能的重要性。

實驗原理

正常紅細懸浮于等滲的血漿中，若置于高滲溶液內，則紅細胞會因失水而皺縮；反之，置于低滲溶液內，則水進入紅細胞，使紅細胞膨脹。如環境滲透壓繼續下降，紅細胞會因繼續膨脹而破裂，釋放血紅蛋白，稱之為溶血。紅細胞膜對低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱為紅細胞的滲透脆性。紅細胞膜對低滲溶液的抵抗力越大，紅細胞在低滲溶液中越不容易發生溶血，即紅細胞滲透脆性越小。將血液滴入不同的低滲溶液中，可檢查紅細胞膜對于低滲溶液抵抗力的大小。開始出現溶血現象的低滲溶液濃度，為該血液紅細胞的最小抵抗力；出現完全溶血時的低滲溶液濃度，則為該血液紅細胞的最大抵抗力。
　　生理學上將與血漿滲透壓相等的溶液稱為等滲溶液；而將能維持紅細胞正常形態、大小和懸浮于其中的溶液稱為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液（如1.99%的尿素溶液），但等張溶液一定是等滲溶液。

主要試劑

1%肝素，1%氯化鈉溶液，蒸餾水。

主要設備

10 ml小試管，試管架，滴管，1 ml移液管。

實驗材料

兔

實驗步驟

1.溶液配制：取10個小試管，配制出10種不同濃度的氯化鈉低滲溶液（0.25%，0.3%，0.35%，0.4%，0.45%，0.5%，0.55%，0.6%，0.65%，0.9%）。詳見下表：

編號	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
1％NaCl	1.4	1.3	1.2	1.1	1.0	0.9	0.8	0.7	0.6	0.5
蒸餾水	0.6	0.7	0.8	0.9	1.0	1.1	1.2	1.3	1.4	1.5
NaCl ％	0.7	0.65	0.6	0.55	0.50	0.45	0.40	0.35	0.30	0.25

2.制備抗凝血不同動物采血方法各有所異,但多采用末梢血.將血滴在有1%肝素的表面皿上,混勻(1%肝素0.1 ml可抗10 ml血)。
3.加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加一滴，輕輕搖勻，靜置1～2 h。
4.觀察結果：根據各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細胞脆性。
①未發生溶血的試管：液體下層為大量紅細胞沉淀，上層為無色透明，表明無紅細胞破裂。
②部分紅細胞溶血的試管：液體下層為紅細胞沉淀，上層出現透明淡紅（淡紅棕）色，表明部分紅細胞已經破裂，稱為不完全溶血。
③紅細胞全部溶血的試管：液體完全變成透明紅色，管底無紅細胞沉淀，表明紅細胞完全破裂，稱為完全溶血。

注意事項

1. 混勻時，輕輕傾倒1～2次，減少機械震動，避免人為溶血。
2. 抗凝劑最好為肝素，其他抗凝劑可改變溶液的滲透性。
3. 配制不同濃度的NaCl溶液時應力求準確、無誤。NaCl溶液的濃度梯度可根據動物的實際情況適當進行調整。