要點1:
Rh遺傳基因位于第1號染色體的短臂上,Rh血型有3個緊密相連的基因位點,每一位點有一對等位基因(D和d,C和c、E和e),這3個基因是以一個復合體形式遺傳。3個連鎖基因可有8種基因組合,即CDe、cDE、cDe、CDE、Cde、cdE、cde和CdE,兩條染色體上的8種基因組合可形成36種遺傳型。
要點2:
Rh抗原命名為C、D、E、c、d、e,雖從未發現過d抗原及抗d活性,但仍保留“d”符號,以相對于D。因此,Rh抗原只有5種,有相應5種抗血清,可查出18種Rh表現型。臨床上,習慣將有D抗原者稱Rh陽性,而將雖有其他Rh抗原而無D抗原者稱為Rh陰性。D陰性人中最常見的基因型為cde/cde。
已發現40多種Rh抗原,與臨床關系最密切的5種為D、E、C、c、e,這5種抗原中D的抗原性最強,對臨床更為重要。
DU(弱D):為一組弱D抗原。盡管DU的抗原性較D為弱,但仍是Rh陽性細胞,所以將DU血輸給Rh陰性受血者時,仍有引起產生抗D的可能性,因此應將DU型供血者作Rh陽性處理,而DU型受血者歸入Rh陰性則較為安全。如果把DU血輸給有抗D者,也可以產生嚴重的溶血性輸血反應。
-D-:-D-/-D-遺傳基因型紅細胞只有D抗原,而缺乏C、c、E、e抗原。此型能與抗D抗體在鹽水中凝集。
要點3:
Rh抗體中,除偶爾可見天然的抗E、抗CW抗體外,其余各種Rh抗原的抗體多系輸血或妊娠時,由外來紅細胞免疫刺激后產生。這些抗體均為IgG,但在免疫應答的早期,也可有IgM成分。
D抗原是非AB0紅細胞抗原中免疫性最強的抗原,可以引起抗D的產生,抗D與D紅細胞產生嚴重的溶血反應。習慣將D陰性者認為是Rh陰性,多不再進行其他Rh抗原檢測,除D抗原外,通常抗E和抗c比較多見。抗CW及抗其他Rh抗原的抗體偶爾也可引起遲發性溶血性輸血反應或新生兒溶血病。
要點4:
紅細胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清檢測來鑒定。雖然Rh血型系統中有許多種抗原,但常規只用抗D血清檢查有無D抗原。當有特殊需要如家系調查、父權鑒定、配血不合等情況時才需用抗C、抗c、抗E、抗e等標準血清做全部表型測定。Rh抗體屬IgG,不能在鹽水介質中與紅細胞發生凝集,因此必須采用以下幾種鑒定方法。
1.低離子強度鹽水試驗:可提高抗D抗體與D陽性紅細胞結合率,并提高其靈敏度。
2.酶介質法:木瓜酶或菠蘿酶可以破壞紅細胞表面的唾液酸,使紅細胞膜失去電荷,縮小紅細胞間的距離;同時酶還可以部分地改變紅細胞表面結構,使某些隱蔽的抗原得以暴露,增強凝集性;且對IgG的作用大于IgM,故有利于檢出不完全抗體。
試劑:IgG型抗D標準血清、1%木瓜酶(或菠蘿蛋白酶)溶液、5%D陽性紅細胞生理鹽水懸液、5%D陰性紅細胞生理鹽水懸液。
要點5:
注意事項:
①Rh血型系統的抗體多由獲得性免疫產生,血清中很少有天然抗體,故不需要做反定型。
②對照:酶易失活,故每次試驗都要設置陽性對照。若陽性對照不出現凝集,表明酶或抗血清已經失效。酶活性過強出現假陽性結果,因而要設立陰性對照,以排除假陽性。只有在陽性對照管出現凝集而陰性對照管不凝集的情況下,才說明被檢管的結果是可靠的。
③結果陰性:說明被檢紅細胞上無相應抗原,但由于DU抗原性弱,因此,如被檢者無凝集,還應進一步檢查以排除DU的可能。
要點6:
(四)交叉配血法
Rh血型系統的交叉配血的原則與AB0血型系統的交叉配血相同。由于此系統的抗體為不完全抗體,故應選用酶介質法、抗球蛋白法或聚凝胺法等。
要點7:
質量控制
1.嚴格設定試劑和抗原陽性和陰性對照系統。
2.嚴格控制反應條件:試驗介質、濃度、溫度、離心、反應時間等條件。
3.受檢者紅細胞必須洗滌干凈,以免血清蛋白中和抗球蛋白,出現假陰性。
要點8:
Rh血型系統臨床意義
抗Rh抗體主要通過輸血或妊娠免疫而產生,較大量的Rh陽性(D抗原陽性)細胞進入Rh陰性者體內后,2~5個月內血漿中可測到抗體,如經再次免疫,3周內抗體濃度可達高峰。
受血者或孕婦血漿中含有Rh抗體時,當再與含相應抗原血液相遇,將引起嚴重輸血反應或新生兒溶血病(常為第2胎溶血)。因此Rh抗體具有十分重要的臨床意義。