1、硼酸緩沖液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸餾水500ml,0.1mmol/LNaOH溶液53ml,加蒸餾水至1000ml。
2、1g/L剛果紅溶液:剛果紅0.5g加生理鹽水500ml。
3、1mol/L HCl溶液。
4、50g/L CaCl2溶液。
5、基質粉制備:血漿與生理鹽水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混勻,37℃水浴60min,用玻棒將纖維蛋白全部卷出,用生理鹽水洗滌兩次后,擠干,置56℃溫箱中烘干備用。取10g纖維蛋白,加1g/L剛果紅溶液100ml,37℃水浴中不斷攪拌,保溫30min,3000r/min離心10min,棄去上清液,用pH7.8硼酸緩沖液反復洗滌至上清無色為止,將與剛果紅結合的纖維蛋白置56℃溫箱烘干備用。
6、分光光度計。
操作方法
離心上述溶液,取上清,分光光度計600nm波長比色,空白調0,測其吸光度值,查標準曲線即可得出纖溶酶活性。。
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