纖維素的高碘酸活化實驗

實驗方法原理

實驗材料 纖維素粉

試劑、試劑盒 NaHCO3-NaIO4碳酸鈉緩沖液。NaBH4 溶液乙酸鈉-乙酸PBS

實驗步驟

實驗所需「試劑」具體見「其他」

將 2 g 纖維素懸浮于 40 ml 0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4 中，黑暗條件下放置 2 h，然后在玻璃料上用 0.1 mol/L pH 9.0 碳酸鈉緩沖液沖洗。在 40 ml 緩沖液中加入待固定的蛋白質（約 1 mg/ml），室溫振蕩過夜。為去除希夫堿，在溶液中加入 2 ml NaBH4，室溫振蕩 30 min。之后再次加入 2 ml NaBH4，室溫振蕩 30 min。用 0.1 mol/L pH 4.0 乙酸鹽-乙酸、PBS 和 0.05％ 的吐溫 20 沖洗固體材料。

注意事項

其他

試劑：

0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4（NaHCO3，Mr＝84.0；NaIO4，Mr＝213.9；8.4 g NaHCO3 ，12.8 g NaHCO3 溶于 100 ml H2O）

0.1 mol/L 碳酸鈉緩沖液（NaHCO3－Na2C03），pH 9.0

NaBH4 溶液（0.1 g NaBH4 溶于 10 ml 0.1 mol/L NaOH，現配）

0.1 mol/L 乙酸鈉-乙酸，pH 4.0

PBS（磷酸緩沖液：10 mmol/L 磷酸二氫鉀-鈉，pH 7.2，0.8％ NaCl，0.02％ KCl）

0.05％ 吐溫 20 溶于 PBS