纖維蛋白原測定（FIB）標準操作規程(SOP)

原理：在確定量的血漿樣本經過一定時間的加溫后，加入試劑。加入試劑后，采用波長為660nm的光照射樣本。凝血過程（纖維蛋白原轉化為纖維蛋白）中血的渾濁度可以通過測量散射光光強度的改變來測定。從散射光光強度的測定，可以做出凝血曲線，通過Percentage Detection Method方法求得凝血時間。

一、儀器：
（一）型號：Sysmex CA—1500自動血液凝血分析儀
（二）分析和計算參數：
1．處理量：約120個測試/小時
2．所需樣本量：10μl
3．檢驗時間：在最長檢驗時間之內測出結果，典型最長檢驗時間：100秒
4．重復性：CV≤4%
5. 計算參數：纖維蛋白原濃度（Fbg）

二、試劑及配套品：
（一）試劑：
1. 凝血酶試劑（Thrombin Reagent）
（1）商標：德靈（DADE BEHRING）
（2）包裝規格：Pack for 10×1ml
（3）代碼：B4233 G25 E0533 (961) W
（4）成分：
牛凝血酶凍干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin）（近似100 NIH units/ml）

（3）代碼：B4234-25
（4）成分：
1）2.84×10-2M的巴比妥鈉 (sodium barbital)
2）1.25×10-1M 的氯化鈉 (sodium chloride)
3) PH 7.35±0.1
3. 清洗液（Cleaning）
2%次氯酸鈉溶液（自配）
（二）配套品：
1.標準血漿（Standard Human Plasma）
(1) 商標：德靈（DADE BEHRING）
(2) 代碼：No. ORKL
2.校準質控血漿（Ci-Trol?）
(1) 商標：德靈（DADE BEHRING）
(2) 代碼：Level 1, B4244-10
Level 2, B4244-20
Level 3, B4244-30
3.質控血漿（Control Plasma）
(1) 商標：太平洋（Pacific Hemostasis）
(2) 代碼及規格：Level 1 (Normal), 100595 10×1ml
Level 2 (Abnormal), 100596 10×1ml
Level 3 (Abnormal), 100597 10×1ml

三、操作步驟：
（一） 開機：開機前，先打開連機的打印機。按下機器右邊的POWER按鈕。開機后機器進行自檢，當屏幕上邊顯示“Ready”時可以進行試驗。
（二）洗針：在主屏幕上選“Rinse Probe”，然后按下“Execute”進行洗針。
（三）準備試劑：按照儀器試劑位置程序要求，把每一項的試劑準備好，放在相應的位置。（注：FIB試劑的配制：在凍干粉試劑瓶中加入1ml的蒸餾水，放置室溫30min。）
（四）準備標本：將室內質控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放10個樣本），準備好放在進樣器上。
（五）準備反應杯：打開儀器上蓋裝反應杯的蓋子，查看反應杯是否夠量，需及時添加。
（六）輸入試驗項目：按下主菜單上的“Work List”鍵，在試驗項目鍵點擊Fbg，使Fbg鍵由“—”變為“O”。如有需要按屏幕下的“Repeat”鍵，儀器會自動重復十個樣本的檢測項目與第一個樣本相同。屏幕右邊的光標移動鍵，按下“NEXT”表示翻到下一個界面，按“↑”表示向上移動光標，“←或→”表示下一個界面試驗項目。
（七）輸入樣本號：按下“ID No.Entry”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號。
（八）開始檢測：待一切準備工作就緒，按下儀器右上角 “START”鍵，儀器開始工作。
（九）查看結果：返回主屏幕，檢測的項目如果由“◎”變為“●”表明此試驗已經完成，然后按下“Stored Date”（儲存結果）鍵，屏幕會換到結果顯示界面，檢測的結果會自動傳輸到此畫面，如果查看反應趨勢圖，按下邊第一個菜單“Graph”，查看凝集趨勢、吸光度、結果等。
（十）洗針：當做完一批標本以后，需要洗針，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute”進行洗針。
（十一）關機：回到主屏幕下，在洗完針以后方可關機，切斷電源，關閉打印機。

四、 參考范圍：FIB ：5—11s
Fbg ：2—4g/L

五、 臨床意義：
（一）Fbg減少見于：
先天性低（無）纖維蛋白原血癥、嚴重肝臟疾病、原發性纖維蛋白溶解、DIC、異常纖維蛋白原血癥、新生兒及早產兒、某些產科意外、惡性腫瘤等。
（二）Fbg增高見于：
各種血栓前狀態及血栓栓塞病、月經期及妊娠期、糖尿病、動脈硬化、結締組織病、手術后、休克、癌腫、骨髓瘤、放射治療后等。

六、病人準備和標本要求：
（一）采血時，首先應該確認病人姓名，并且將姓名和編號寫在真空采血管的標簽處。
（二）盡可能保證每次采血都在同樣的條件下進行，即病人處于休息狀態，并且在早餐前采血。
（三）凝血實驗標本最好不與其它實驗一起采集，否則由于標本的分配、分裝等而使血液停留在針管的時間延長。
（二）取血時，病人應松弛，環境溫暖，防止靜脈痙攣，止血帶的壓力應盡可能小，取血速度平穩順利，防止產生氣泡。，。
（三）用定量為3毫升的一次性枸櫞酸鈉（0.11mol/L）真空采血管采血至指定刻度，取血完畢立即輕輕顛倒混均混合均勻，不要劇烈震蕩，并避免產生氣泡。
（四）及時離心，3000轉/分離心標本10分鐘，以除去血小板。
（五）務必于采血后2小時內測定完畢,如不能完成試驗，冷凍貯存少量血漿（0.5—1ml）（最好在-70℃，或者當貯存時間較短時，可以置于-20℃條件下），在實驗前將血漿于37℃下快速融化。血漿用塑料管存放，并用塑料吸管移取標本。

七、操作注意事項：
（一） 許多的實驗誤差都來源于技術的錯誤。在實驗技術、試劑、溫度及PH值上很小的變化都會導致試驗結果明顯的變化。孵育時間與溫度是凝血酶原時間測定時應嚴格控制的參數。血漿絕不能在37°C下放置10min。
（二） 實驗前應檢查血漿是否有溶血、黃疸、脂血或出現凝塊。