用ETDA 和胰蛋白酶混合消化法傳代的過程如下
1. 吸出培養瓶內營養液，注入EDTA（0.02%）和胰蛋白酶（0.25%）混合液（1：1），注入量以能覆蓋細胞為度，置37 ℃溫箱或室溫中作用3 分~5 分鐘。
在消化過程中，要在鏡下隨時監視細胞狀態，當見到細胞胞質回縮，胞體趨于變圓，細胞相互間縫隙變大時，便立即終止消化。
細胞上述變化在已連接成片的細胞最為明顯；可見細胞由于胞質回縮，而相互分離，遂失去原來緊密接觸關系，出現明顯可見的縫隙。如消化過度則細胞能完全從瓶壁脫落，這時需要做離心分離以防細胞丟失，增加了麻煩；
2. 吸出消化液，注入適量Hanks液洗一二次；注意注入時要緩慢，不要讓液體直接沖刷細胞多的部位，朝向瓶底或瓶角部為好，以避免把細胞從瓶壁上沖下來，然后手持培養瓶輕輕晃動，讓Hanks液體在細胞面上來回流動，以洗掉殘余的消化液，不要用力過猛，否則能把附著不牢的細胞沖掉，減少細胞數量；
3. 吸出Hanks液，加入適量培養液后，用吸管吸、吹營養液，反復輕輕吹打瓶壁上細胞，使之脫落入培養液中形成細胞懸液。
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