1. 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。 2. 待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3. 稀釋的第一杭體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應能蓋住切片）。 4. 用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。
5. 以PBS冼玻片3次（5 min/次），從切片一端加入新的PBS緩沖液，由另一端吸去舊的緩沖液。
6. 稀釋的第二抗體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每載玻片可加40~50 μl 抗體）。 7. 加免疫金標記第二抗體溫育2 h。 8. 顯微鏡下觀察結果或放密閉玻片盒中，室溫貯放。
9. 顯微鏡下觀察結果，或置玻片盒中貯于4℃。 展開 | 