細胞和亞細胞提取物的制備實驗5

利用細菌獲得用于純化的重組蛋白是非常方便的。為了檢測誘導和重組蛋白的表達水平，評估方法的快速簡單是很重要的。本方案使用 0.5% TritonX-1OO 裂解細胞，小量制備細菌提取物。

表達目標重組蛋白的細菌細胞

二硫蘇糖醇（DTT)樣品緩沖液TritonX-100

水浴鍋超聲破碎儀

1.室溫離心 1min，從 1ml 培養物中收集細菌。

2.去除上清，用 1ml 預冷的 0.5%(體積分數）TritonX-100 重懸細菌細胞的沉淀物。

3.超聲波處理懸浮液，3 個循環，每次 20s。超聲間隙把細胞放在冰上冷卻。

4.將懸浮液在小型離心機中離心 lmin。

5.在上清液中加入 Lammli 樣品緩沖液（含有 100 mmol/L DTT)。混合物煮沸 2 min，用分析級 SDS-PAGE 分析目的蛋白（見方案 1)