（1）欲冷凍保存之細胞應在生長良好（logphase）且存活率高之狀態，約為80–90％致密度。細胞凍存前應保證細胞的活力好，無污染
（2）冷凍前檢測細胞是否仍保有其特有性質，例如hybridoma應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
（3）3.一定要保證DMSO的濃度是10%，凍細胞要舍得用進口的DMSO
（4）注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色（以0.22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650），以5～10ml小體積分裝，4℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。
（5）慢凍,快解凍。細胞在 -15 度左右胞內形成結晶對細胞損傷，緩慢降溫有助于減少損傷，故放入 -20 度冰箱中凍存可實現緩慢降溫較為方便，保存時間過久會影響細胞活力。