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  • 發布時間:2019-03-30 15:16 原文鏈接: 細胞凋亡的形態:生化性質實驗——吖啶橙染色

    實驗材料

    細胞

    試劑、試劑盒

    染液

    儀器、耗材

    試管

    實驗步驟


    1b)將1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃試管的底部。加入25μL細胞懸浮液,轉動手腕輕柔地混合。


    2b)將10μL的該混合液放在一干凈的顯微鏡載玻片上,蓋上22 mm2的蓋玻片。用一 落射光顯微鏡的40×到60×的干物鏡和一適合觀察熒光素的濾光片結合起來檢查。


    3b)計數至少200個細胞,記錄正常和凋亡的細胞核的數量。


    活的和死亡的非凋亡的細胞核呈現熒光綠色,而且有「結構」;熒光強度變化反映常染色質和異染色質的分布。而凋亡的核,在核周邊有很高的濃縮的半月斑;另外,整個核表現為一個或一群無特色的、明亮的、球狀的顆粒。更進一步的凋亡,細胞會失去DNA或被弄碎成「凋亡小體」,而且整體的明亮度低于正常細胞。


    4b)計算凋亡細胞的百分比(凋亡指數)如下:


    凋亡細胞%=(細胞總數-活細胞總數)/細胞總數×100%

    展開


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