一、材料與設備
小麥幼苗
直徑8cm 培養皿,10 ml 量筒,100 ml 量筒,藥物天平,小漏斗,小剪刀,25 ml 容量瓶,研缽,濾紙,721分光光度計
藥品
100pp M 激動素溶液:10毫克激動素用少量0.1N HCl溶解,用蒸餾水定容至100 ml 。
丙酮,0.1NHCl,80%g丙酮。
二、實驗步驟
1.在7個培養皿中分別加入蒸餾水和0.05pp M ,0.5pp M ,5pp M ,50pp M 的激動素溶液各10 ml 。每一處理重復3次。
2.選生長一致的小麥幼苗,剪下第一完全葉,切去尖端1.5cm ,取其后3cm 長的切斷。向每一培養皿放進此切斷0.500-1.000克。然后將培養皿放在散射光下培養1-2周。
3.從培養皿中取出小麥葉片,用濾紙吸干水分,放入研缽中。再向研缽中放入少量石英砂,少量碳酸鈣以及4-5 ml 80%丙酮,仔細研磨成漿,過濾到100 ml 容量瓶中,研缽用80%丙酮4-5 ml 洗兩次,洗出液過濾。濾渣和濾紙再放入研缽中,研磨,過濾。如此反復,直到濾出液無綠色。濾液用80%丙酮定容至100 ml 。
4.將721分光光度計靈敏度轉在3的位置,以80%丙酮為空白對照,在663n M 和645n M 處比色。
三、結果
葉綠素濃度按下式計算:
〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663
〔ch1〕=葉綠素濃度,單位 M g/升。
D645:葉綠素溶液在645n M 處的消光值。
D663:葉綠素溶液在663n M 處的消光值。 展開 |