實驗方法原理
細胞分裂素可阻礙核酸水解酶和蛋白水解酶的產生，因此能延緩器官衰老，使離體葉片保綠， 保綠作用的強弱可通過測定葉綠素含量的變化來衡量，也可由葉色變黃枯死的時間來衡量。 | |
| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 一、材料、儀器設備及試劑 1. 材料：黃瓜子葉，蘿卜子葉。 2. 儀器設備：電子分析天平，分光光度計，恒溫培養箱，恒溫水浴鍋，25 ml容量瓶，25 ml刻度試管，試管架，移液管，黃瓜子葉的培養皿（直徑5cm），瓷盤，刀片，尖頭鑷子， 濾紙，吸耳球等。 3. 試劑及配制：100μg· ml－16－BA溶液，95﹪乙醇 ，CaCO3粉末。 100μg· ml－16－BA母液配制：準確稱取6－BA 10mg, 加幾滴1mol·L－1HC1溶解（可 稍加熱溶解），然后慢慢加入蒸餾水稀釋后定容至100 ml。 二、實驗步驟 1. 黃瓜幼苗的培養 精選黃瓜種子，播入墊有濾紙的瓷盤中，加蒸餾水使之濕潤（注意種子不能漬水），待種 子萌發后，在光下培養2～3d左右，直至子葉綠化。備用。 2. 系列濃度6－BA溶液配制：吸取100μg· ml－16－BA母液，稀釋成10、5、0.5 μg· ml－1的系列濃度溶液。 3. 離體黃瓜子葉的培養 3.1取4套培養皿，編號，每套培養皿各墊一張濾紙，分別作0.5、5、10μg· ml－1的6－ BA溶液和蒸餾水(CK)4個處理，即為第一組。 3.2 選取子葉大小、生長一致的黃瓜幼苗20株，每處理5 株（10片子葉），用刀片切下不 附帶葉柄的子葉，分別稱取鮮重，將數據記入下表中。然后將子葉放入第一組相應編號的 培養皿中，分別加入不同濃度的6－BA溶液3 ml, 對照（CK）加蒸餾水3 ml。蓋上培養皿 蓋，置于暗處，溫度25－28℃培養3 d 。 另取與第一組相同的黃瓜幼苗20株，用刀片切下不附帶葉柄的子葉作第二組，直接用來測 定葉綠素含量。 4. 第二組黃瓜子葉葉綠素含量的測定 4.1葉綠素的提取 取3支25 ml刻度試管，編號。稱取第二組的黃瓜子葉三份（3個重復），每份10片子葉，然 后放入相應編號的刻度試管中，各加入少量CaCO3粉及95﹪乙醇3－4 ml，用玻棒小心將子 葉搗碎后，將試管放入45℃恒溫水浴提取葉綠素30min左右，直到子葉碎片無色為止，用濾 紙過濾于25 ml容量瓶中（如殘渣仍帶綠色，可再加幾 ml乙醇繼續提取，直至殘渣無綠色） 。濾紙上的色素用乙醇慢慢點滴清洗入容量瓶中，最后定容至刻度，搖勻，待測。 4.2 葉綠素含量的測定 在652nm波長處，以95﹪乙醇為空白對照，測定葉綠素提取液的吸光度（A值）。并按公式 計算出葉綠素含量。即為培養前子葉的原始葉綠素含量。 5. 第一組黃瓜子葉葉綠素殘留量的測定 第一組黃瓜子葉在暗處培養3d后，按上述第（4）步驟方法分別測定各處理子葉葉綠素含量， 并按公式計算出各處理葉綠素含量，即為暗培養后子葉葉綠素含量。 三、結果計算 葉綠素含量計算公式：  四、記錄結果 按下表記錄實驗數據并分析結果  |