細胞化學染色分類技術

染色技術是分類白細胞的經典依據，但瑞氏染色這類形態學復合染色不能被自動分析所模擬。一般光學技術只能測到光強等量的參數，而不能測得波長等屬性的參數。因此，自動分類就要求用單染來甄別。

過氧化氫是生物氧化還原反應的最重要氧化劑，在吞噬過程中廣泛應用。因此，可以根據細胞過氧化氫酶染色來推斷白細胞的吞噬功能強弱，并結合細胞的大小，從而將白細胞分為：高過氧化氫酶的嗜酸性粒細胞、次之的中性粒細胞、較弱單核細胞以及沒有過氧化氫酶的淋巴細胞和嗜堿性粒細胞四類。從而達到分類的目的。由于一般嗜堿性粒細胞很少，因此沒有過氧化氫酶的細胞可以近似的認為是淋巴細胞。

方法：將血加入到含有清洗劑和甲醛的高滲液體內，其中清洗劑（含非離子活性劑）使細胞破壞，甲醛使白細胞漿內酶被固定。此后加入過氧化氫和4- 氯-萘酚、加熱，如果待檢細胞漿中含有過氧化氫酶即可分解過氧化氫產生[O]，后者可使4-氯-萘酚顯色并沉積定位于酶反應部位。細胞通過測試區時，由于酶顯色不同和細胞大小的差異，激光束射到細胞上前向角和散射角不同。以X軸為吸光率標記（酶反應強度），Y軸為光散射（細胞大小），每個細胞產生的兩個信號，即可將白細胞分為四類。

由于淋巴細胞和嗜堿性粒細胞沒有過氧化氫酶所以不能分開，為了解決嗜堿性粒細胞的測定問題，一般采用堿性溶劑將其他白細胞溶解，用體積法測得嗜堿性粒細胞。