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  • 發布時間:2021-06-09 16:10 原文鏈接: 細胞化學染色檢查(二)

      (2)臨床意義

        1)幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者ACP 染色為陽性反應,后者為陰性反應。

        2)幫助診斷多毛細胞白血病。多毛細胞白血病時多毛細胞的酸性磷酸酶染色為陽性反應,此酶耐L-酒石酸的抑制作用。淋巴肉瘤細胞和慢性淋巴細胞白血病的淋巴細胞,酸性磷酸酶染色也呈陽性反應,但此酶可被L-酒石酸抑制。

        3)幫助鑒別T 淋巴細胞和B 淋巴細胞,T 淋巴細胞呈陽性反應,而B 淋巴細胞為陰性反應。

        5﹒α-醋酸萘酚酯酶(alpha-naphtholactateesterase,α-NAE)染色

        (1)原理:血細胞內的α-NAE 將基質液中的α-醋酸萘酚水解,產生α-萘酚,萘酚再與堅牢藍B 耦聯,形成不溶性灰色黑色或棕黑色沉淀,定位于胞質內。

        (2)正常血細胞的染色反應

        1)單核細胞系統:原始單核細胞為陰性反應或弱陽性反應;幼單核細胞和單核細胞為陽性反應,這種反應可被氟化鈉抑制。

        2)粒細胞系統:各期粒細胞為陰性反應,有時少數粒細胞可呈弱陽性反應,此反應不被氟化鈉抑制。

        3)巨核細胞和血小板為陽性反應。

        4)其他細胞:幼紅細胞和淋巴細胞一般為陰性反應,有時少數細胞也可呈弱陽性反應,此反應被氟化鈉抑制;漿細胞為陰性反應。

        (3)臨床意義

        1)幫助鑒別急性白血病類型:急性單核細胞白血病時,白血病原始單核細胞可呈陽性反應,幼單核細胞和單核細胞大多呈陽性反應,此反應能被氟化鈉抑制,抑制率在50%以上;急性粒細胞白血病時,白血病原始粒細胞為陰性反應,有時個別白血病原始粒細胞可呈陽性反應,但此反應不能被氟化鈉抑制;急性淋巴細胞白血病時,白血病原始淋巴細胞為陰性反應,有時原始淋巴細胞可出現陽性反應,主要見于T 細胞型急淋;急性粒-單核細胞白血病時,部分白血病細胞呈陽性反應,并能被氟化鈉抑制,這些白血病細胞可能是單核細胞系細胞,部分白血病細胞呈陰性反應,可能是粒細胞系細胞。

        2)紅血病或紅白血病中的異常幼紅細胞可呈陽性反應。

        3)巨幼細胞貧血的巨幼細胞也可呈陽性反應。

        6﹒α-丁酸萘酚酯酶(alpha-naphtholbutyrateesterase,α-NBE)染色

        (1)原理:血細胞內的α-NBE 在堿性條件下,將基質液中的α-丁酸萘酚水解,釋出α-萘酚,α-萘酚與基質液中的堅牢紫醬GBC 耦聯,形成不溶性紅色沉淀,定位于胞質內。

        (2)正常血細胞的染色反應

        1)粒細胞系統:各期粒細胞均為陰性反應。

        2)單核細胞系統:原始單核細胞為陰性反應或陽性反應,幼單核細胞和單核細胞為陽性反應,此反應可被氟化鈉抑制。

        3)組織細胞:可呈陽性反應,但酶反應不被氟化鈉抑制。

        4)淋巴細胞:外周血的T 淋巴細胞可呈致密的局限性點狀陽性反應,B 淋巴細胞為陰性反應,非T 非B 細胞也可出現散在顆粒狀陽性反應。

        5)其他血細胞:巨核細胞和漿細胞為陰性反應或弱陽性反應。

        (3)臨床意義

        1)急性粒細胞白血病時,白血病原粒細胞為陰性反應;急性單核細胞白血病時,白血病原始單核細胞、幼單核細胞和單核細胞可呈陽性反應;急性粒-單核細胞白血病時,部分白血病細胞呈陽性反應,部分白血病細胞呈陰性反應。

        2)急性單核細胞白血病有時須與組織細胞白血病鑒別。異常組織細胞也可呈陽性反應,但酶反應不被氟化鈉抑制,而白血病單核細胞的陽性反應可被氟化鈉抑制。

        7﹒堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)染色

        (1)原理

        1)鈣-鈷染色法:血細胞的ALP 在pH9.6 左右的堿性條件下將基質液中的β甘油磷酸鈉水解,產生磷酸鈉。磷酸鈉與硝酸鈣發生反應,形成不溶性磷酸鈣。磷酸鈣與硝酸鈷發生反應,形成磷酸鈷。磷酸鈷與硫化銨發生反應,形成不溶性灰黑色的硫化鈷沉淀,定位于酶活性之處。

        2)Kaplow 偶氮耦聯法:血細胞內的ALP 在pH9.4~9.6的條件下將基質液中的α-磷酸萘酚鈉水解,產生α-萘酚與重氮鹽耦聯形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之處。

        (2)正常血細胞的染色反應

        1)ALP主要存在于成熟中性粒細胞,除巨噬細胞可呈陽性反應外,其他血細胞均呈陰性反應。

        2)成熟中性粒細胞ALP 積分值的計算:在油鏡下,計數100 個成熟中性粒細胞(包括中性分葉核粒細胞和中性桿狀核粒細胞),分別記錄其分級情況,全部陽性反應的細胞之和即為陽性率,將所有陽性反應細胞均以“+”級表示后,計算其總積分值。

        參考值:成熟中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)的積分值為7~51。由于各實驗室的實驗條件不同,正常值也有差異,應建立本實驗室的正常值。這里的正常值僅供參考。

        (3)臨床意義

        1)生理變化

        年齡變化:新生兒NAP 活性增高,以后下降。兒童期各年齡大致相似,成年期較兒童期活性減低,老年期更低。

        應激狀態下的變化:緊張、恐懼、激烈運動等NAP 活性可增高。

        月經周期中的變化:經前期增高,行經后降低,經后期恢復。

        妊娠期的變化:妊娠2~3 個月的NAP 積分值輕度增高,以后逐月增高,分娩時達高峰,產后則恢復正常。

        2)病理性變化

        感染:細菌性感染時NAP積分值增高。在細菌性感染中,球菌性感染較桿菌性感染為高;在球菌性感染中,急性較慢性為高;病毒性感染時,NAP 積分值一般無明顯變化。因此ALP 染色法有時可幫助鑒別細菌性感染和病毒性感染。

        血液病:慢性粒細胞白血病的NAP 積分值明顯減低,常為“0”,緩解時NAP 積分值上升到正常;類白血病反應時的NAP積分值明顯增高,中性桿狀核粒細胞的ALP 活性增強,甚至中性晚幼粒細胞也呈陽性反應。因此ALP 染色法常用來鑒別慢性粒細胞白血病和類白血病反應及觀察慢性粒細胞白血病的療效。急性粒細胞白血病時NAP 分值減低;急性淋巴細胞白血病時NAP 積分值一般增高,因此ALP 染色可作為鑒別急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的方法之一。急性單核細胞白血病時NAP 積分值一般減低,有時可正常。粒細胞白血病合并細菌性感染時NAP 積分值可增高,但不如單純細菌性感染增高的明顯。再生障礙性貧血的NAP 積分值增高,當病情好轉時,NAP積分值可下降,完全緩解時NAP 活性可恢復到正常,因此ALP 染色對再障的診斷、療效觀察和估計病情均有一定意義。陣發性睡眠性血紅蛋白尿的NAP 積分值減低,因此可作為鑒別陣發性睡眠性血紅蛋白尿和再生障礙性貧血的方法之一。真性紅細胞增多癥的NAP 積分值升高,而繼發性紅細胞增多癥的NAP 積分值無明顯變化,因此可用以鑒別真性紅細胞增多癥和繼發性紅細胞增多癥。骨髓增生異常綜合征的NAP 積分值減低,紅白血病的NAP 積分值減低,慢性淋巴細胞白血病、骨髓纖維化、原發性血小板增多癥和紅血病等疾病的NAP 積分值可增高。NAP 積分值減低,也可見于鐮形細胞性貧血、嚴重型嗜酸粒細胞增多癥、家族性低磷酸酶血癥。

        其他:應用腎上腺皮質激素、雌激素和ACTH 后NAP 積分值增高。

        8﹒過碘酸-雪夫(periodicacid-Schif,PAS)反應(糖原染色)

        (1)原理:過碘酸是氧化劑,使含乙二醇基的多糖類物質氧化,形成雙醛基。醛基與雪夫試劑中的無色品紅結合,形成紫紅色化合物,附著于含有多糖類的胞質內。紅色的深淺與細胞內能反應的乙二醇基的量成正比。

        (2)正常血細胞的染色反應

        1)粒細胞系統:原始粒細胞為陰性反應;自早幼粒細胞至中性分葉核粒細胞均呈陽性反應,并隨細胞的成熟,陽性反應的程度逐漸增強;嗜酸性粒細胞的顆粒本身不著色,而顆粒之間的胞漿呈紅色;嗜堿性粒細胞為陽性反應,陽性反應物質為大小不一的紫紅色顆粒。

        2)紅細胞系統:幼紅細胞和紅細胞均呈陰性反應。

        3)單核細胞系統:原始單核細胞為陰性反應,幼單核細胞為(+)陽性反應,單核細胞為(+)~(++)陽性反應。有時在胞質的邊緣處陽性反應顆粒較粗大。

        4)淋巴細胞:大多數淋巴細胞為陰性反應,少數淋巴細胞可呈(+)陽性反應。

        5)巨核細胞和血小板:巨核細胞為陽性反應,陽性反應物質為紅色顆粒狀,有時為紅色塊狀。血小板為陽性反應,陽性反應物質為細顆粒狀,有時為紅色小塊狀。

        6)其他細胞:漿細胞一般為陰性反應,少數可呈陽性反應,陽性反應物質為紅色細顆粒狀。巨噬細胞可呈陽性反應,陽性反應物質為紅色細顆粒狀。

        (3)臨床意義

        1)紅細胞系統

        紅血病或紅白血病:幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應的幼紅細胞百分比增高,陽性反應的程度也很強,有時紅細胞也呈陽性反應。

        缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征:幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應的幼紅細胞百分比也較高。有時紅細胞也可呈陽性反應。

        巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等:幼紅細胞為陰性反應,有時僅個別幼紅細胞呈陽性反應。

        2)白細胞系統

        急性淋巴細胞白血病:白血病性原始淋巴細胞的陽性反應物質為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅。

        急性粒細胞白血病:白血病性原始粒細胞的陽性反應物質呈均勻分布的紅色細顆粒狀或呈均勻紅色。

        急性單核細胞白血病:白血病性原始單核細胞的陽性反應物質呈紅色細顆粒狀,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。

        3)其他細胞:幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞或Reed-Sternberg細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性或陰性反應。

        幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-皮克細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性反應,且空泡中心為陰性反應。

        幫助鑒別白血病細胞和腺癌骨髓轉移的腺癌細胞,后者呈強陽性反應,陽性反應物質為紅色細顆粒狀或粗顆粒狀,有時呈紅色塊狀。

        參考文獻: 
        1 黃世林等.急性早幼粒細胞白血病中西醫治療與研究.第1版.北京.人民衛生出版社,2006年06月                

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