第1天
把菌株9-1在YPD平板上劃單克隆，于30°C下培養
第3天
上午，把菌株9-1的菌落接種到5mlYPD培養液中，于30°C下培養。將YPD平板置于4°C下儲存以備第13天使用。
第4天
按照“技術和方案1，酵母的高效轉化”將未切的質粒PCY204(來自指導老師）轉化到菌株9-1。記住設置一個不含DNA的轉化對照。每個轉化液取20ul涂于SCura平板，在30°C下培養。不含DNA的轉化對照同樣操作。
第7天
把4個轉化子在SC-ura平板上劃單克隆，于30°C下培養。
第9天
將每個轉化子的單菌落接種到5mlYPD，于30°C下培養。這將使丟失質粒的細胞得以生長.
第10天
使用血球計數板（附錄G，用標準血球計數板進行酵母細胞計數）測定細胞密度，用無菌蒸餾水適當稀釋。用每1〇〇4體積含有105?106個細胞的菌液涂5-FOA平板。
對URA3基因進行反篩選以便使已經丟失了pCY204的細胞能夠生長，將剩下的YPD培養物保存于4°C以供第12天使用。
第12天
將每個轉化子的9個5+0八1^菌落接到YPD平板（共36個）制備一塊原平板，包括親本菌株9-1。從第10天培養的4個中間培養物中分別取34點到原平板上，在30°C下培養此YPD平板。將菌株9-2和9-3分別接到2管5mlYPD培養液中，在30°C下振蕩培養。
第13天
用15u1菌株9-2和15u1無菌水涂SD平板，使其干燥。用菌株9-3在另一塊SD平板上重復這一過程。將原平板影印到SD平板上。每一個平板都用新的絨墊以防止平板間的污染。同時將原平板影印到一個產孢平板和一個SC-ura平板上。
第15天
統計接合能力和在SC-um平板上的生長情況。
第17天
統計孢子形成能力，用牙簽將細胞挑到載玻片上的水滴中，在相差顯微鏡下觀察細胞 展開 | 
