一、準備工作對開展細胞培養異常重要，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試等。
1.清潔、消毒、液體
直接接觸細胞的用品要超凈處理——無非必須分子
直接接觸細胞的用品要徹底消除微生物
超凈和消毒過的樣品要絕對密閉保存，標記消毒時間
實驗室保持潔凈，隨時消毒
盡量采用商品化一次性用品
操作者也要清潔和消毒
緩沖液要符合生理滲透壓（280～310 mOsm）和pH（7.2～ 7.4 ）
2.玻璃器皿超凈
去污劑煮沸30min（超聲波震蕩30min） 溫水刷洗 流水沖洗 酸性洗滌液浸泡 流水沖洗 蒸餾水沖洗 純水漂洗 在潔凈溫箱中烤干 密封消毒
3.消毒
干熱——玻璃器皿 160℃，120min
濕熱（高壓，120 ℃ ） 10~20磅，20~30min
紫外線——空氣
消毒劑——場面
微孔過濾——液體 0.22um、0.45um
二、細胞生長的條件和培養基要求：選擇合適的培養基，保證全過程的無菌
細胞的營養需要：氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子、蛋白質、促生長因子。其中很多成分系用血清、胚胎浸出液等提供，在很多情況下還需加入10％的胎牛或新生牛血清。
培養基的制備：a..濃度要準－滲透壓、b. 酸堿度要適宜－酸度計
細胞的生存環境：a.. 溫度、b.氣相、 c.滲透壓－－290mmol/L