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  • 發布時間:2019-04-22 22:41 原文鏈接: 細胞消化胰酶的配制

    適用于,無師兄、師姐、非細心、單獨開展細胞培養的實驗者

    對一般細胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)
    配方:100ml PBS,0.25g胰酶
    步驟:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O
    /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)
    2 稱胰酶0.25g
    3 加入PBS中,低速攪拌 〈4h冰浴中,或者4℃過夜
    低速攪拌0.5h冰浴中
    4 調PH7.4
    5 仍在冰浴中
    6 過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內用完
    tip:低速很重要,機械攪拌對酶是一種沖擊,如果起沫,
    酶就變性了。低溫,防止酶失活
    對難消化的細胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)
    tip:因為EDTA可以絡合Ca2+,增加消化效力 

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