細胞生物學實驗技術

細胞生物學實驗技術

METHODS AND TECHNIQUES

第一節顯微技術

光學顯微鏡：以可見光（或紫外線）為光源。

電子顯微鏡：以電子束為光源。

一、光學顯微鏡

（一）普通光學顯微鏡

1、構成：

①照明系統

②光學放大系統

③機械裝置

2、原理：經物鏡形成倒立實像，經目鏡進一步放大成像。

3、分辨力：指分辨物體最小間隔的能力。

R=0.61λ/N．A．

其中λ為入射光線波長；N．A．為鏡口率＝ｎsinα/2，n=介質折射率；α=鏡口角（樣品對物鏡鏡口的張角） 。

思考：如何提高顯微鏡的分辨能力？

表一、幾種介質的折射率

介質 空氣 水 香柏油 α溴萘

折射率 1 1.33 1.515 1.66

顯微鏡的幾個光學特點：

制作光學鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78，所用介質的折射率越接近玻璃的越好。

sin α /2的最大值必然小于1；介質為空氣，鏡口率一般為0.05~0.95；油鏡頭用香柏油為介質，鏡口率可接近1.5。

普通光線的波長為400~700nm，分辨力數值不會小于0.2μm，人眼的分辨力為0.2mm,因此顯微鏡的最大設計倍數為1000X。