細胞組分的化學反應實驗

實驗方法原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后，其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應，一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力，且這兩種染料的作用有選擇性，甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色，呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量分析。

實驗材料 小白鼠

試劑、試劑盒 PBS緩沖液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固綠硫酸銅聯苯胺混合液番紅過碘酸酒精液Schiff氏酒精液亞硫酸水蘇木精Carnoy固定液

儀器、耗材 光學顯微鏡解剖器材蠟盤載玻片吸水紙染色缸蓋玻片水浴箱

實驗步驟

一、方法

1.  接種Hela細胞于蓋片上并培養24~48小時，使長成單層。

2.  取出蓋片，用PBS（pH7.2）輕輕沖洗蓋片表面去除殘渣。

3.  放入Carnoy固定液中固定l小時。

4.  浸入甲基綠-呱咯寧醋酸緩沖液中30分鐘染色。

5.  取出蓋片放入蒸餾水中輕輕漂洗2~3次（2~3秒鐘左右），吸去水分。放入純丙酮中分色2~3秒鐘。

6.  放入1/2丙酮+1/2二甲苯中5秒鐘。

7.  放入純二甲苯中透明5分鐘。

8.  滴一滴中性樹膠于載玻片上，將蓋片標本面朝下封片。

9.  鏡下觀察

二、結果

細胞質被染成淺紅色，細胞核被染成藍綠色，而其中核仁被染成紫紅色。