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  • 發布時間:2020-08-17 22:29 原文鏈接: 細胞蛋白質總量樣品的制備及分析

    實驗步驟

     
    取 20 mg 異硫氰酸熒光素,加 20 ml 無水乙醇,使 FITC 充分溶解,即為染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具體熒光染色步驟如下:

    1. FITC 貯存液的稀釋:用 pH 7.4 的 PBS 液稀釋成 50 μg/ml 濃度的工作液,備用。

    2. 被染色細胞首先用 70% 酒精破膜,作用 10 min,使 FITC 染料能進入到細胞中。

    3. 用離心法以 PBS 液洗去破膜劑,離心收集細胞。

    4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入樣品中,混勻,置 4℃ 冰箱中反應 30 min。

    5. 用 PBS 液以 1500 r/min 離心 5 min,洗去染色液,再離心去上清。

    6. 再加 0.5 ml PBS,混勻,上機檢測。


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