(intermediate filament)又稱中等纖維，直徑約為8～11nm，介于細絲與粗絲之間，因而得名。中間絲可分為五種，各由不同蛋白質構成。在成體中絕大部分細胞僅含有一種中間絲，故具有組織特異性，且較穩定。五種中間絲的形態相仿，難于分辨。但用免疫組織化學方法則能將它們區分，從而可進一步分析細胞的類型。
(1) 角質蛋白絲（keratin filament）： 分布于上皮細胞，在復層扁平上皮細胞內尤其豐富，常聚集成束，又稱張力絲（tonofilament)。張力絲附著于橋粒（一種細胞連接），能加固細胞間的連接。張力絲除起支持作用外，還有助于保持細胞的韌性和彈性。
(2) 結蛋白絲（desmin filament)：分布于肌細胞，在橫紋肌細胞內，結蛋白絲所形成的細網連接相鄰肌原纖維并使肌節位置對齊；在Z膜股處，細網包圍肌原纖維并與細胞膜連接。在平滑肌細胞內，結蛋白絲連接在密體與密斑之間形成立體網架，并與肌動蛋白絲相連。總之，結蛋白絲作為肌細胞的細胞骨架網，發揮固定和機械性整合作用。
(3) 波形蛋白絲(vimentin filament）：主要存在于成纖維細胞和來自胚胎間充質的細胞。在少數含有兩種中間絲的細胞中，波形蛋白絲是其中的一種，波形蛋白絲主要在核周形成網架，對核起機械性支持，并穩定其在細胞內的位置。
(4) 神經絲（neurofilament):存在于神經細胞的胞體與突起中，由神經絲蛋白組成，與微管共同構成細胞骨架，并協助物質運輸。
(5) 神經膠質絲（neurogial filament)：主要存在于星形膠質細胞內，由膠質原纖維酸性蛋白組成，多聚集成束，交織走行于胞體，并伸入突起內。