細胞饑餓實驗用什么培養基
培養基的選擇:
細胞培養是實驗室里最常見和最基本的實驗了,但卻不是最簡單的。別小看細胞培養,這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。
◆ MEM是由Eagle’s基礎培養基(BME)發展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
◆ 改良的BEM(DMEM)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用于各種細胞類型,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆ RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。
準備幾種培養基,然后花大約兩周的時間做一個簡單的細胞生長實驗,來選擇其中最適合的。
以前大部分實驗室都是用干粉培養基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調pH值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質并不理想,所以培養的效果會有差異。