根據以上分型原理,鑒定致病性霍亂弧菌應遵循以下3個步驟:
① 可疑菌落與Ο1群抗血清凝集,確定是屬于Ο1群,還是非Ο1群弧菌。
② 與分型血清A、B凝集,確定血清型。
③ 作生化試驗進行生物分型,確定是古典生物型,還是El-tor生物型。
3.其他弧菌的鑒定:弧菌屬中除Ο1群霍亂弧菌多次暴發世界性流行霍亂病,非Ο1群中的Ο139群最近報告暴發霍亂流行。其他弧菌種,不僅與腹瀉有關,尚可引起腸外感染。分離出上述菌株應予以鑒定。本菌屬中致病的12個菌種其生物學特性參照表5—3—37所列及表5—3—40分群鑒定。
表5-3-40 弧菌屬的分群鑒定
試驗 1群 2群 3群 4群 5群 6群
霍亂弧菌 擬態弧菌 麥氏弧菌 辛辛那提弧菌 霍利斯弧菌 海魚弧菌 河弧菌 弗尼斯弧菌 溶藻弧菌 副溶血弧菌 致傷弧菌 沙魚弧菌
0%NaCl中生長 + + - - - - - - - - - -
1%NaCl中生長 + + + + + + + + + + + +
氧化酶 - + + + + + + + + +
硝酸鹽 - + + + + + + + + +
精氨酸 + - + + + - - - -
賴氨酸 - + + + +
鳥氨酸 -
肌醇 - - - + - - - - - - - -
鑒定中用0%NaCI生長、氧化酶、硝酸鹽、氨基酸及發酵肌醇等幾個試驗將上述12個菌種分成6個群。分群后,僅1群、5群和6群還需要繼續區分。
霍亂弧菌與擬態弧菌的區別方法可以用蔗糖發酵試驗,前者陽性而后者陰性(表5—3—37)。
第5群3個菌種的區別可依據甘露醇發酵和葡萄糖產氣試驗,3種細菌的反應特征見表5—3—37。
第6群的4個菌種的區別可依據水楊苷和蔗糖發酵試驗,4種細菌的反應特征見表5—3—37。
1992年10月發生在印度南方泰米爾納依邦(Tamilmadu)的Madas,分離到與Ο1群霍亂弧菌無關、命名為Ο139型霍亂弧菌,該菌的生物學特性符合霍亂弧菌,用Ο1群霍亂弧菌抗血清不能制動,綿羊RBC溶血反應不定,抗多粘菌素B(50U)和復方新諾明,抗Ο/1