抗酸染色法acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich）首創并經F．齊爾（Ziehl）改進而創造出的細菌染色法。其中最具代表性的為對結核菌的齊爾-尼爾森（Ziehl－Neelsen）染色法和齊爾-加貝特（Ziehl－Gabbet）染色法。用石炭酸復紅染色后，用鹽酸乙醇分色，再用美藍進行對比染色，即不再脫色而呈現石炭酸復紅的紅色。
抗酸染色的原理
分枝桿菌的細胞壁內含有大量的脂質，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復紅牢固結合成復合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當再加堿性美蘭復染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質為藍色。
抗酸染色的染液配制
1、石炭酸復紅 堿性復紅酒精飽和溶液 10mL 5%石炭酸 90mL
2、3%鹽酸酒精 濃鹽酸 3mL 95%酒精97mL
3、呂氏美蘭液 美蘭酒精飽和液 30mL 氫氧化鉀（1:10000）100mL