細菌形態觀察及單染色

一、實驗目的

1. 了解簡單染色法的原理，并掌握其操作方法。

2.學習并掌握微生物涂片、染色的基本技術和無菌操作技術。

3.鞏固顯微鏡(油鏡)的使用方法。

4.初步認識細菌的形態特征。

二、實驗原理

細菌個體微小，且較透明，必須借助染色法使菌體著色，與背景形成鮮明的對比，以便在顯微鏡下進行觀察。根據實驗目的不同，可分為簡單染色法、鑒別染色法和特殊染色法等。簡單染色法是最基本的染色方法，是利用單一染料對細菌進行染色。此法操作簡便，適用于菌體一般形狀和細菌排列的觀察。常用堿性染料進行簡單染色。

三、試劑與器材

1. 材料 大腸桿菌，枯草芽孢桿菌

2.試劑 呂氏堿性美藍染液(或草酸銨結晶紫染液)、齊氏石炭酸復紅染液。

3.器材 顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環、雙層瓶(內裝香柏油和二甲苯)等。

四、實驗內容簡單染色法：涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→鏡檢

五、關鍵步驟及注意事項

1. 涂片時，生理鹽水及取菌不宜過多，涂片應盡可能均勻。

2.水洗步驟水流不宜過大，過急，以免涂片薄膜脫落。