一、目的和要求
1.掌握無菌操作技術。
2.學習微生物涂片、染色的基本技術。掌握細菌 的簡單染色方法。
3.鞏固顯微鏡的使用方法。
二、原理與操作
1.無菌操作
2.細菌的簡單染色
(1)觀察微生物 時為什么必須采用染色方法細菌、真菌、和其他微生物的細胞質是透明的,不借助染色方法很難觀察到這些微生物。
(2)簡單染色的生化原理
細菌細胞通常帶負電荷,簡單染色時采用已知的、帶正電荷的堿性染料與菌體細胞黏附使菌體著色。經染色后的細菌細胞與背景形成鮮明對比。
3.操作步驟
制片——固定——呂氏堿性美藍染液(或石碳酸復紅染液)染色1-2分鐘——水洗——干燥——鏡檢
三、器材
菌種:枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和藤黃微球菌(Micrococcus luteus)的斜面培養物。
染液:呂氏堿性美藍染液、齊氏石炭酸復紅染液。
儀器和其他用具:顯微鏡、擦鏡紙、 接種環、酒精燈、載玻片、鑷子等。
四、實驗報告
繪圖示枯草芽孢桿菌和藤黃微球菌