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  • 發布時間:2019-04-08 22:22 原文鏈接: 細菌的致病性與宿主非特異性免疫實驗3

    巨噬細胞的吞噬作用

    實驗步驟

    1.  試驗前一天,給小鼠腹腔注射2%淀粉水溶液l ml,使巨噬細胞從腹膜血管滲到腹腔。

    2. 制備2%雞紅細胞懸液l:取抗凝的雞血2 ml加生理鹽水8-l0 ml,混勻2000 rpm離心沉淀5  min,吸棄上清,同法再洗二次,末次2000 rpm離心沉淀10 min吸棄上清。吸壓積的紅細胞0.2 ml加入9.8ml生理鹽水中,混勻后即為2%雞紅細胞懸液。

    3.  24小時前注射淀粉的小鼠,腹腔注射2%雞紅細胞懸液1 ml。輕揉腹部,30 min后用頸椎脫臼法使小鼠死亡。死后立即剖開腹腔,用滴管吸出腹腔液滴在玻片上,每片約0.2 ml。

    4.  把玻片放入37 ℃溫箱中孵育30 min。

    5.  取出玻片,用pH6.4的PBS輕輕沖洗玻片。巨噬細胞,中性粒細胞等吞噬細胞在孵育過程中已粘附在玻片上,輕輕沖洗不掉,其他非吞噬細胞則大部分被沖洗掉。

    6.  用吹風機立即吹干,姬姆薩一瑞氏染色。

    7.  結果:可見雞紅細胞被巨噬細胞吞噬。巨噬細胞及雞紅細胞的胞漿被染成淡紅色,核為紫蘭色。被吞噬的雞紅細胞尚未消化者,胞漿和核很清晰;剛開始消化的,胞漿色變淺,界限不清;消化后的胞漿消失,僅留下紫色的核或淺紫色的核輪廓。 

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    注意事項

    大小吞噬細胞的吞噬作用有何異同?


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