1. 制備標本片
（1）取干凈載玻片1塊，用記號筆劃分為2個區域，并作好標記；
（2）兩區各加生理鹽水1小滴
（3）用滅菌接種環分別挑取少量細菌，在個生理鹽水中混勻鋪開，形成一薄層菌膜。
（4）在室溫下自然干燥。
（5）將標本通過火焰2～3次固定標本，自然冷卻。
2. 革蘭氏染色
（1）初染：在菌膜上滴加結晶紫，以蓋滿菌膜為度，約1分鐘后，用細水流將染液沖洗。
（2）酶染：滴加盧戈氏碘液數滴，約1分鐘后輕輕沖洗。
（3）脫色：滴加95%酒精3～4滴，輕輕晃動玻片數秒鐘，傾斜玻片棄去酒精，如此反復數次后，流下的酒精幾乎無色或稍呈淡紫色，最后沖洗。
（4）復染：滴加稀釋復紅染液數滴，約1分鐘后沖洗。
染色完畢后，用吸水紙將玻片吸干，滴加香柏油，鏡檢。
3. 結果判定：白色葡萄球菌被染成紫色，為革蘭氏陽性（G＋）菌，大腸桿菌被染成紅色，為革蘭氏陰性（G－）菌， 展 | 