由于結核分枝桿菌感染在近些年呈復燃趨勢,臨床中我們經常要對可疑患者施行結核分枝桿菌檢查,除標志性的影像學改變外,眾多檢查中實驗室檢查最為常用、便捷,下面我們一同回顧一下臨床中常用的實驗室相關的檢查方法:
病原學檢查
1、痰涂片檢查
痰標本涂片采用萋-尼抗酸染色法、免疫熒光法,具有快速、簡便等優點,不足之處在于抗酸染色鏡檢不能區分結核和肺結核分枝桿菌,而免疫熒光法在敏感度上優于抗酸染色法,但其視野范圍廣,易出現假陽性。故痰涂片檢查可用于分枝桿菌的常規篩查。通常連續檢查≥3次,可提高檢出率,痰涂片陰性不能除外肺結核感染。
2、結核菌培養
分離培養法是診斷結核病的金標準,采用改良羅氏和BactecTB系統進行培養,后者較前者可縮短檢測時間,是近年來常用的結核菌培養方式。
3、分子生物學檢測
聚合酶鏈式反應(PCR)技術可將標本中微量的結核菌DNA加以擴增,但仍有假陽性的情況發生,這是由于DNA樣本提取過程中遭受污染等技術原因,并且不能區分活菌與死菌,故不能用于評估結核病的治療效果和流行病學調查研究等,僅推薦在非結核分枝桿菌病高發地區圖片抗酸抗菌陽性病例中使用,來快速區分結核與非結核分枝桿菌。
4、結核菌抗原和抗體檢測
采用ELISA方法檢測痰標本中結核抗原的結果差異甚大,這可能與痰標本中結核菌抗原分布不甚均勻有關,而對血液標本中抗體的檢測其臨床意義尚不明確,主要用于臨床和影像學疑似肺結核而不易獲得痰標本的兒童及痰菌陰性的肺結核患者,但特異性差,敏感性低。
5、γ-干擾素釋放試驗(IGRA)
新型診斷性試驗,采用結核桿菌比較特異性抗原(卡介苗和絕大多數非結核桿菌所不具有),在體外刺激血液單核細胞釋放干擾素-γ,敏感性欠佳但特異性大多在95%以上,可用于臨床輔助診斷,但不能區別結核活動或潛在感染。
結核菌素(PPD-C 5TU)皮膚試驗(TST)
TST陽性對診斷意義不大,因其受到的影響因素較多,如急性病毒感染或疫苗注射、免疫抑制性疾病或藥物、營養不良、結節病、腫瘤、其他難治性感染、老年人遲發過敏反應衰退者,可出現假陽性。但對未種卡介苗者提示受結核分枝桿菌感染,或體內有活動性結核病。當呈強陽性時,表示機體處于超敏狀態,結核發病概率高,可作為診斷結核病的參考指標。美國則根據不同年齡、免疫狀態、本土居民還是移民(來自何地)等對TST判斷有不同標準。
支氣管鏡相關檢查
經纖維鏡檢查或肺內病灶鉗取活組織做病理檢查,同時采用刷檢、沖洗或吸引標本用于結核菌涂片和培養,有利于提高肺結核的診斷和特異性,尤其適用于痰涂片陰性等診斷困難患者。