耐多藥結核病(MDR-TB)和廣泛耐藥結核病(XDR-TB)是目前臨床亟待解決的難題之一。因此,快速、準確地檢測標本中耐藥結核分枝桿菌(MTB)至關重要。采用多色探針熔解曲線法可快速檢測MTB對利福平、異煙肼、鏈霉素、乙胺丁醇和氟喹諾酮類藥品常見耐藥決定區域,簡便、快速,閉管檢測,不會交叉污染或造成實驗室污染,只需1臺通用的熒光定量PCR儀,無需繁瑣的雜交、顯色過程,整個檢測過程只需2~3 h,可較全面地了解耐藥基因突變信息(《中國防癆雜志》編輯委員會, 中國醫療保健國際交流促進會結核病防治分會基礎學組和臨床學組. 結核分枝桿菌耐藥性檢測專家共識. 中國防癆雜志, 2019, 41(2): 129-137)。
多色探針熔解曲線法快速檢測MTB耐藥基因突變情況在臨床上得到廣泛應用,適用于多種臨床樣本。
臨床分離株:熒光PCR探針熔解曲線法檢測MTB對利福平、異煙肼、乙胺丁醇、鏈霉素和氟喹諾酮類藥品的耐藥性具有良好的效能,可為臨床醫生制定用藥方案提供重要依據(曹志華, 趙悅竹, 胡雙雙. 熒光PCR探針熔解曲線技術檢測結核分枝桿菌對五種抗結核藥物耐藥性的研究. 中國防癆雜志, 2019, 41(2):156-161)。
痰標本:以MGIT 960藥敏試驗結果為參照,對2057份涂片陽性痰標本進行研究,多色熔解曲線法檢測顯示出對MDR-TB和XDR-TB的良好檢測性能,敏感度分別為86.7%和71.4%(Pang Y, Dong H, Tan Y, et al. Rapid diagnosis of MDR and XDR tuberculosis with the MeltPro TB assay in China. Sci Rep, 2016, 6:25330)。
膿液標本(骨結核):166例疑似骨結核患者的膿液標本,以臨床綜合診斷為參照標準,熒光PCR熔解曲線法的檢測敏感度高于MGIT 960培養法(孫秀華,李瑩,孫嬌,等. 不同檢測方法在骨結核診斷中的應用效果比較.中國民康醫學,2020,32(2):90-92)。
組織標本:多色熔解曲線分析技術能夠應用于組織標本中的MTB檢測,有較高的敏感度,且能夠篩查更多的耐藥項目,對于臨床有更大的應用價值(Che NY, Huang SJ, MA Y, et al. Comparison of Histological, Microbiological, and Molecular Methods in Diagnosis of Patients with TBLN Having Different Anti-TB Treatment Background. Biomedical and Environmental Sciences, 2017, 30(6): 418-425)。