1.實驗室檢查
（1）血生化檢查 測定血鈣、磷、堿性磷酸酶，血清25-（OH）D3（正常10～80g/L）和1,25-（OH）2D3（正常0.03～0.06g/L）在佝僂病活動早期就明顯降低，為可靠的早期診斷指標，血漿中堿性磷酸酶升高。
（2）尿鈣測定 尿鈣測定也有助于佝僂病的診斷，尿中堿性磷酸酶的排泄量增高。
2.其他輔助檢查
（1）長骨骨骺端X線攝片 發現長骨骨骺端佝僂病的特異X線表現，早期X線長骨骺部鈣化預備線模糊；極期鈣化預備線消失、骨骺端增寬、骺端呈杯狀或毛刷狀改變，骨質稀疏、骨干彎曲變形或骨折。
（2）X線骨齡攝片 發現骨齡落后。