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  • 發布時間:2023-05-24 15:56 原文鏈接: 罌粟果提取物的鑒別步驟及含量測定

      鑒別步驟

      (1)取本品約0.1g,加5%醋酸溶液5ml,振搖2分鐘,用氨水調pH值約為9,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有機層,置蒸發皿中,水浴蒸干,殘留物加稀鐵氰化鉀試液,即顯藍綠色。

      (2)取本品約0.1g,加水2ml與氨試液數滴,用三氯甲烷10ml,振搖10分鐘,分取三氯甲烷液,置蒸發皿中,水浴蒸干,殘留物加甲醛硫酸試液2滴,即顯深紅色。

      (3)取本品約25mg,置錐形瓶中,加5%醋酸溶液5ml,超聲處理5分鐘,取出,濾過,取濾液,用氨水調pH值約為10,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有機層,減壓蒸干,殘留物加甲醇1ml溶解,作為供試品溶液。另取嗎啡對照品適量,用甲醇溶解并制成每1ml中約含嗎啡1.0mg的溶液,照薄層色譜法(附錄Ⅴ B)試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-甲醇-氨水(85:10:5)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以稀碘化鉍鉀試液,供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同。

      含量測定

      照高效液相色譜法(附錄Ⅴ D)測定。 色譜條件與系統適用性試驗 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈(5:5:2)為流動相;檢測波長為 220nm。理論板數按嗎啡峰計算不小于1000。固相萃取柱系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物,以測定法中相同的處理條件和洗脫條件試驗。精密量取濃度為每1ml中約含0.5mg的嗎啡對照品溶液0.5ml,置處理后的固相萃取柱上,同法洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻。精密量取該洗脫液與含量測定項下的對照品溶液各10μl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。

      洗脫液與對照品溶液色譜圖中嗎啡峰面積的比值應在0.97~1.03之間。 測定法 取固相萃取柱一支,依次用甲醇-水(3:1)15ml與水5ml沖洗,用pH 值約為9的氨水溶液(取水適量,滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH約為9,待用。取本品約10g,研成粗粉(過80目篩),精密稱取1g,置20ml量瓶中,加5% 醋酸溶液適量,超聲處理30分鐘使嗎啡溶解,取出,放至室溫,用55醋酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液0.5ml,置上述固相萃取柱上,滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9(上樣前,另取同體積的續濾液預先試驗,以確定滴加氨試液的量),搖勻,待溶劑滴盡后,用水20ml沖洗。以含10%甲醇的5% 醋酸溶液洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻,精密量取10μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。

      另取嗎啡對照品適量,精密稱定,用含有10%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含嗎啡0.05mg 的溶液,搖勻,同法測定。按外標法以峰面積計算,即得。

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