羅氏診斷應用科學部近日宣布推出兩款新產品:High Pure FFPET RNA Isolation Kit和RealTime ready cDNA Pre-Amp Master & Primer Pools,適用于福爾馬林固定和石蠟包埋的組織(FFPET)。
據估計,現有超過10億個FFPE樣品,這對開展轉化研究和轉化醫學研究的科研、制藥和生物技術研究人員來說是一個尚未開發的寶貴數據資源。這些不同年代和組織類型的樣品可能包含了臨床結果方面的信息,是生物標志物發現、疾病發展分析及其他臨床研究中回顧性研究的最佳選擇。
新的High Pure FFPET RNA Isolation Kit帶來了出色的RNA完整性和產量,這是兩個關鍵因素,可確保多個下游應用獲得高質量的結果,如qRT-PCR、芯片分析和測序。在基因表達研究中,分離出的RNA可轉錄成cDNA,隨后與新的RealTime ready cDNA Pre-Amp Master一起預擴增。這個試劑盒利用定制的引物池(primer pools)預擴增微量的DNA。這種方法可確保無偏向擴增,并適合任一目的基因。
High Pure FFPET RNA Isolation Kit能夠從5-10 μm厚的FFPE組織切片中分離和純化總RNA。顯微切割樣品或活檢材料也可使用。分離出的RNA適用于qRT-PCR和芯片分析。脫蠟后的組織經一種特殊的裂解液裂解,并與蛋白酶K一起孵育。在離液鹽存在時,RNA可與High Pure過濾管的玻璃纖維特異結合。結合后的RNA經DNase處理,并經過一系列洗滌-離心的步驟,可從柱上洗脫。整個過程大約需要2.5小時,包括脫蠟步驟。
RealTime ready cDNA Pre-Amp Master & Primer Pools是一種即用型的熱啟動反應混合液,適用于少量cDNA的預擴增。它能夠預擴增1-250 ng的cDNA,并確保無偏向擴增,適合任一目的基因。所有的RealTime ready分析可定制并經過功能檢測,并附有詳細的分析描述和生物信息學背景信息。
羅氏應用科學部qPCR和樣品制備系統的主管Gerd Haberhausen表示:“我們的新產品為那些分析FFPET樣品的基因表達,并確保最佳結果的研究人員提供了既方便又靈活的解決方案。通過提供可定制的引物以及我們新的RNA分離試劑盒,我們能夠為研究mRNA表達譜的科學家提供一個完整而可靠的流程。”