黃曲霉素(Aflatoxins)
黃曲霉素存在于花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中。霉菌的生長并不一定表明黃曲毒素的存在,因為黃曲毒素只有在濕度、溫度適合及通風良好才會生成。黃曲霉素B類具有藍色熒光,G類具有綠色熒光。除了蔬菜中常見的(B1,B2,G1,G2),還有存在喂食了有毒飼料的奶牛的牛奶中的黃曲霉素M,其中毒性最高的M的代謝物為4-羥基化的產物Bs.
1993年黃曲霉毒素被世界衛生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定為1類致癌物,是一種毒性極強的劇毒物質。黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物肝臟組織有破壞作用,嚴重時,可導致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素b1最為多見。其毒性和致癌性也最強。
1根據國標《GB/T 18979-2003》,使用柱后衍生方法可以在一次測定過程中,在同一熒光發射波長下同時檢測出這六種黃曲霉素。(Pickering公司提供)
經過黃曲霉素免疫親和柱凈化,經過柱后后衍生熒光檢測。
純化回收率
| 基質 | B1 | B2 | G1 | G2 |
| 玉米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 107% | 91% | 103% | 75% |
| 大米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 107% | 93% | 98% | 85% |
| 麥芽(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 98% | 99% | 97% | 70% |
| 葡萄干(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 99% | 106% | 101% | 69% |
分析條件:
色譜柱:MYCOTOX柱,1612124。
溫度:42℃
流速:1.0mL/min
流動相:MeOH,CH3CN,H2O; 22:22:56,
柱后衍生條件:
柱后衍生系統:Pinnacle PCX 1.4mL反應器
溫度:95℃
試劑:I2 100mg/L 水溶液
檢測:熒光檢測,氙燈
激發波長:365nm 檢測波長:430nm
儀器與耗材
| 貨號 | 名稱 | 品牌 | 規格 |
| 46300-U | 黃曲霉素混合標準品 | Supleco | 溶于苯:乙腈(98:2) 1mL×5個 |
| 46323-U | 黃曲霉素B1標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46324-U | 黃曲霉素B2標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46325-U | 黃曲霉素G1標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46326-U | 黃曲霉素G2標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 12058 | 黃曲霉素免疫親和柱 | Afla | AflaCLEAN 樣品前處理柱 分析黃曲霉素- 25 columns/box |
| 1827-00110 | 玻璃纖維濾紙 | Whatman | 11cm孔徑1.5um |
| 80665 | 液相進樣針 | Hamilton | 100ul |
| 1153-1032 | 柱后衍生系統 | Pickering | 反應體積1.4mL |
| 1612124 | MYCOTOX反相柱 | Pickering | C18,4.6×250 mm |
| 18ECG001 | 保護柱夾套 | Pickering | 帶3個保護柱 |
2. 根據國標《GB 5413.37—2010》食品安全國家標準乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測定
(摘自Sigma-Alchrich 公司)
色譜柱:Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm
柱壓:230bar
流 速:0.3ml/min
柱 溫:35℃
試液溫度:20℃
進樣量:10ul
流動相:A液,0.1%甲酸溶液; B液,乙腈-甲醇溶液(1+1)
| 時間(min) | 流動相A% | 流動相B% | 梯度變化曲線 |
| 0 | 68.0 | 32.0 | |
| 4.25 | 55.0 | 45.0 | 線性 |
| 5.00 | 0.0 | 100.0 | 線性 |
| 5.70 | 0.0 | 100.0 | 即時 |
| 6.00 | 68.0 | 32.0 | 線性 |
儀器與耗材
| 貨號 | 名稱 | 品牌 | 規格 |
| 46319-U | 黃曲霉素M1標準品 | Supleco | 10ug/ml, 溶于乙腈 |
| 12058 | 黃曲霉素免疫親和柱 | Afla | AflaCLEAN 樣品前處理柱 分析黃曲霉素- 25 columns/box |
| 53823-U | Ascentis Express C18 | Supleco | 2.7um, 2.1×100mm |
| AP-SE-12B | 固相萃取裝置 | Ameritech | 方形12孔 |
| AVP-7120 | 真空系統 | Ameritech | 抽氣速度:20L/min;真空度:200mbar |
| 532122N | 針式過濾器 | Ameritech | 水系微孔濾膜13mm 0.22um 200個 |
3 高效光化學反應法測定黃曲霉素B1(摘自LcTech)
此法檢測成本低,可用等度HPLC直接測定
流動相:水/甲醇/乙腈:60/30/15 (v/v/v)
流速:1.2mL
進樣量:100uL
色譜柱:RP C18
熒光檢測:發射波長:365nm,接收波長:460nm
光化學衍生是一種簡單、便宜、靈活的技術,可提高很多分析物質檢測的靈敏度和選擇性。黃曲霉素B1可在8分鐘以內出峰,且檢測信號明顯增強
| 貨號 | 名稱 | 品牌 | 規格 |
| 46323-U | 黃曲霉素B1標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 12058 | 黃曲霉素免疫親和柱 | Afla | AflaCLEAN 樣品前處理柱 分析黃曲霉素- 25 columns/box |
| 1100-3348 | UVE 光化學反應器 | Pickering | 光化學反應器單元,240V |
| 10522 | 黃曲霉毒素分析柱RP C18 | Lctech | 150×4.6mm |
| 10523 | RP C18保護柱芯 | Lctech | 3個/包 |
| 10750 | 保護柱套 | Lctech | 1個 |
4根據《 GBT 17480-2008 飼料中黃曲霉毒素B1的測定酶聯免疫吸附法》
(LcTech公司提供)
LCTech AflaREAD ELISA試劑盒能夠定量檢測黃曲霉素B1,即使是濃度很小的黃曲霉素B1,也能夠定量檢測。ELISA試劑盒能夠快速、容易的從多種產品中分析出黃曲霉素B1,如堅果、杏仁、大米、玉米、香料或動物飼料。AflaREAD 的檢測限非常低,為0.1 ppb.
| 貨號 | 名稱 | 品牌 | 規格 |
| 11139 | AflaREAD ELISA試劑盒 | LcTech |
|
| 46323-U | 黃曲霉素B1標準品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
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