肌肉組織染色實驗

實驗方法原理

肌肉組織由肌細胞和肌纖維組成，帶有橫紋結構，通常選用 Mallory 磷鎢酸-蘇木精染色法（PTAH）顯示橫紋肌的變化情況。染色劑與所選擇的組織成分能夠牢固地結合，呈藍色或棕紅色。

實驗材料 石蠟組織切片

試劑、試劑盒 蘇木精磷鎢酸蒸餾水 高錳酸鉀水溶液硫酸水溶液二甲苯乙醇中性樹膠

實驗步驟

Mallory 磷鎢酸-蘇木精染色液：蘇木精 0~1 g，磷鎢酸 2 g，蒸餾水 100 ml。將蘇木精置 20 ml 蒸餾水中加熱溶解，再將磷鎢酸溶于 80 ml 蒸餾水中。蘇木精冷卻后加入磷鎢酸水溶液，混合后置室溫數周至數月成熟，可久存。如急用，可再加入 0.177 g 高錳酸鉀而促其成熟。

酸性高錳酸鉀液：0.5％ 高錳酸鉀水溶液 50 ml，0.5％ 硫酸水溶液 50 ml。

1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。

2. 自來水洗 1 min，蒸餾水洗 1 min。

3. 在酸性高錳酸鉀液中氧化 5~10 min。

4. 自來水洗 1 min，蒸餾水洗 1 min

5. 用 1％ 草酸液漂白 2 min。

6. 自來水洗，蒸餾水洗 2 次。

7. 入 Mallory 磷鎢酸-蘇木精染色液中 12~48 h。

8. 直接用 95％ 乙醇分化 30 s。

9. 無水乙醇急速脫水，二甲苯透明和中性樹膠封固。

注意事項

1. 磷鎢酸-蘇木精配制后在室溫下自然成熟，可用多年，使用時不要搖動。

2. 95％ 乙醇快速分色時，注意切片上保持一定的紅色，無水乙醇脫水后，迅速用濾紙吸干、透明和封固。

其他

結果：橫紋肌呈紫藍色，結締組織纖維呈棕紅色。