實驗方法原理 用已知的傷寒桿菌H,O抗原和甲,乙型副傷寒桿菌H抗原,與病人血清作定量凝集試驗,以測定患者血清中有無相應抗體,根據抗體含量的多少及增長情況,可幫助診斷傷寒及副傷寒。
實驗步驟
1. 取小試管28支,分四排置于試管架上,每排7支,于每排第一管分別標記H,O,PA,PB 符號。
2. 于各管內加入生理鹽水0.5 mL。
3. 于每排第一管各加入1:10病人血清0.5 ml混勻后。從第一排第1管吸出0.5 ml。
注入第一排的第2管作倍比稀釋,依次稀釋至第6管,并從第6管棄去0.5 ml,第7管為對照。
4. 其他三排按同法稀釋。
5. 每排從第7管開始,由后向前每管加入菌液。第一排各管加0.5 mlH菌液,第二排各管加0.5 ml菌液,第三排各管加0.5 mlPA菌液,第四排各管和加0.5 mlPB菌液。
6. 振搖試管架,混勻上述液體,置37 ℃18~24 h后取出觀察結果。
7. 結果觀察
觀察時先勿振搖,以免凝塊分散。先看對照管,后看試驗管。
凝集程度以"+","++","+++","++++"表示,不凝集以"一"表示。"++++":完全凝集,管底有邊緣不整齊的膜狀凝集塊,上層液體澄清透明。
"+++":大部分凝集,凝塊非全部下沉于管底而是稍有鋪,上層液體澄清。
"++":部分凝集,管底有部分凝集塊,上層液體微混濁。
"+":小部分凝集,管底有小量凝集塊,上層液體較混濁。
"一":無凝集,液體呈均勻混濁。
記錄實驗結果及凝集效價。
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