pH 穩定計法
顯色法
| 實驗方法原理 | |
|---|---|
| 實驗材料 | 膽堿酯酶 |
| 試劑、試劑盒 | Tris-HCl 氯化乙酰膽堿 氯化鎂 NaOH |
| 儀器、耗材 | 自動滴定器 |
| 實驗步驟 |
空白對照:保持 pH 7.4,持續記錄幾分鐘每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。 樣品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并記錄 5 min 每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。 計算 25℃ pH 7.4 時,每分鐘一個單位水解的 1 umol 乙酰膽堿。
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| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑: 0.02 mol/L Tris-HCl,pH7.4 2.2 mol/L 氯化乙酰膽堿(Mr=181.7;40 g 溶于 100 ml 水中,碘化丁酰膽堿,Mr=301.2) 0.2 mol/L 氯化鎂(MgCl2·6H2O;Mr=203.3;4.1 g 溶于 100 ml 水中) 0.01 mol/L 氫氧化鈉標準溶液作為滴定劑,加入自動滴定器的滴管中 膽喊酯酶,溶于 H2O 中,1 mg/ml
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