制法要求
本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控制
性狀
本品為白色或類白色結晶性粉末
鑒別
取本品約2mg,置白色點滴板上,加對甲苯磺酰-L精氨酸甲酯鹽酸鹽試液0.2ml,攪勻,即顯紫色。
檢查
酸度取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中含2mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為5.0~7.0溶液的澄清度取本品,加0.9%氯化鈉溶液溶解并稀釋制成每1ml中含10mg的溶液,依法檢查(通則0902第法),溶液應澄清。糜蛋白酶照紫外可見分光光度法(通則0401)測定底物溶液取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取0.067molL磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫二鈉溶液61.1ml,混合,pH值為7.0)50ml,溫熱使溶解,冷卻后再稀釋至刻度,搖勻。冰凍保存,但不得反復凍融。供試品溶液取本品適量,精密稱定,加0.001mo/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.25mg的溶液測定法取底物溶液2.0nl、0.001mol/L鹽酸溶液0.2ml與上述磷酸鹽緩沖液(pH7.0)1ml,混勻,作為空白。精密量取供試品溶液0.2ml,加底物溶液(預熱至25℃±0.5℃)3.0ml,立即計時并搖勻,使比色池內的溫度保持在25℃士0.5℃,在237nm的波長處,每隔30秒讀取吸光度,共5分鐘,每30秒鐘吸光度的變化率應恒定,且恒定時間不得少于3分鐘。以吸光度為縱坐標,時間為橫坐標,作圖,取在3分鐘內成直線部分的吸光度,按下式計算AP=0.00751×w×供試品效價(u/mg)式中P為每2500胰蛋白酶單位中含糜蛋白酶的量,單位;A2為直線上開始的吸光度;A1為直線上終止的吸光度;T為A2至A1讀數的時間,分鐘;W為測定液中含供試品的量,mg;0.0075為在上述條件下,吸光度每分鐘改變0.0075,即相當于1個糜蛋白酶單位限度每2500單位胰蛋白酶中不得多于50單位的糜蛋白酶干燥失重取本品適量,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥4小時,減失重量不得過5.0%(通則0831)
效價測定
照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定底物溶液制成后應在2小時內使用。取N-苯甲酰L精氨酸乙酯鹽酸鹽85.7mg,加水溶解使成100ml,作為底物原液;取10ml,用磷酸鹽緩沖液(取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液13ml與0.067mol/L磷酸氫二鈉溶液87ml混合,pH值為7.6)稀釋成100ml,恒溫于25.0℃±0.5℃,以水作空白,在253mm的波長處測定吸光度,必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調節,使吸光度在0.575~0.585之間供試品溶液取本品適量,精密稱定,加0.001mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含50~60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液3.0ml,加0.001mol/L鹽酸溶液200μl,混勻,作為空白。另精密量取供試品溶液2004,加底物溶液(恒溫于25.0℃±0.5℃)3.0ml,立即計時,混勻,使比色池內的溫度保持在25.0℃士0.5℃,在253nm的波長處,每隔30秒讀取吸光度,共5分鐘。以吸光度為縱坐標,時間為橫坐標,作圖;每30秒吸光度的改變應恒定在0.015~0.018之間,呈線性關系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求,應調整供試品溶液的濃度,再作測定。在上述吸光度對時間的關系圖中,取成直線部分的吸光度,按下式計算。P 0.003TW 式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量,單位;A1為直線上終止的吸光度;A2為直線上開始的吸光度;T為A1至A2讀數的時間,分鐘;W為測定液中含供試品的量,mg;0.003為在上述條件下,吸光度每分鐘改變0.003,即相當于1個胰蛋白酶單位
類別
蛋白分解酶
貯藏
遮光,密封,在陰涼干燥處保存。
制劑
注射用胰蛋白酶