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  • 發布時間:2020-09-14 15:25 原文鏈接: 膠體金免疫金銀組織化學技術

    Kausche等(1939)煙草花葉病毒吸附到金顆粒上,在電鏡下觀察金離子呈高電子密度。然而膠體金技術作為標記物應用于IHC是由Fauld 和Taylor(1971)在《免疫化學雜志》上報道了應用膠體金標記抗沙門菌抗血清,檢測細菌表面抗原,并在電鏡下看到在細菌抗原—抗體結合部位上的膠體金顆粒。他們的這一研究成功地為免疫金技術的發展奠定了基礎。膠體金能穩定又迅速地吸附蛋白質,而蛋白質的生物活性沒有明顯的改變,并從電鏡水平過渡發展到光鏡水平的應用。膠體金可以作為探針進行細胞表面和細胞內多糖、糖蛋白、蛋白質、多肽、抗原、激素及癌基因蛋白等生物大分子的精確定位。其優點可列舉數十條,例如:


    ①膠體金溶液可以重復制備,其顆粒大小可以控制,可較容易進行免疫電鏡的雙重或多重標記;

    ②金標探針有很高的電子密度,有特殊的分辨率,定位準確;

    ③金標探針能發射二次電子和反射電子,是掃描電鏡目前最理想的標記物;

    ④金標探針與組織細胞內的抗原結合后,可用銀增強,大大提高了IHC的敏感性,是目前最為敏感的IHC方法之一;

    ⑤免疫金銀染色方法無致癌性,使用較安全。

    膠體金技術是以膠體金作為一種標記物。膠體金是指金的水溶膠,它具有一般溶膠的特性。溶膠是指一種物質以或大或小的微小粒子分散在另一種物質中所形成的體系。被分散的物質叫分散相,容納分散相的另一種物質稱為分散介質。

    根據分散相質點的大小不同,可將分散系分為三大類。

    (1)離子分散體系 是指分散相以小分子(1nm以下)或離子狀態存在,具有高度的穩定性,無論放置多久,分散相顆粒都不會因重力而下沉,不會從溶液中分離出來。

    (2)膠體分散體系 是指分散相顆粒直徑在1~100nm之間的分散體系。其外觀透明,不渾濁,在普通顯微鏡下看不到它的分散粒子,不易受重力影響與分散介質分離沉降,但其中的溶膠粒子有聚結變大的傾向,即具有聚結不穩定性。


    (3)粗分散體系 分散相顆粒是由許多分子組成,因粒子較大,用肉眼或顯微鏡即可見,其特點是不穩定,常因重力而自動沉降,外觀渾濁不透明。



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